坦布苏病毒在种鸭中垂直传播及关其对种鸭的致病性研究-预防兽医学专业毕业论文.docx

关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所 关于学位论文原创性和使用授权的声明 本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所 取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个 人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。 本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同 意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子 版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论 文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印 或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 保密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名：导师签名：摧l亟塞 日 期：2，S，∥∥ 万方数据 符号说明 符号说明 l呲Y吣2㈣78㈣6m1眦9帅211|I 缩写 英文名称 中文名称 Amp ampicillin 氨苄青霉素 bp base pair 碱基对 CDNA complementary DNA 互补DNA DEPC diethyl pyrocarbonate 焦碳酸二乙酯 DH0 duck hemorrhagic ovaritis 鸭出血性卵巢炎 DMEM dulbecco’s modified eagle’S mediun 达尔伯克改良伊格尔培养基 DNA deoxyfibonucleotide acid 脱氧核糖核酸 dpi day post inoculation 接种后第几天 E．coli Escherichia colibacterer 大肠埃希氏杆菌 ELD50 mean embryo lethal dose 胚半数致死量 ELISA enzyme linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附试验 kDa 硒lo—dalton 千道尔顿 LA Latex agglutination assay 乳胶凝集试验 LAMP Loop—mediated isothermal amplification 环介导等温扩增反应 姗 nanometer 纳米 nt nucleotide 核苷酸 0D optical density 光密度值 0I疆 open reading frame 开放阅读框 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 RT reverse transcription 反转录 SPF specific pathogen free 无特定病原体 TMUV Tembusu virus 坦布苏病毒 U Unit 单位 UTR untranslated region 非编码区 万方数据 目 目 录 中文摘要 ．．I ABSTRACT ． ． ． ． ． ．． ． ．．IV 1前言 1 1．1坦布苏病毒感染概述 ．1 1．2 TMUV的生物学特性 ．1 1．2．1分类地位 。2 1．2．2形态结构和核酸类型 ．．2 1．2．3分子生物学特性 ．．3 1．2．4理化特性和培养特性 ．．5 1．3 TMUV感染的流行病学 ．6 1．4 TMUV感染的临床症状及病理变化 ．7 1．4．1临床症状 一7 1．4．2病理变化 ．．8 1．5 TMUV感染的诊断方法 ．．9 1．5．1临床诊断 9 1．5．2实验室检测 9 1．6坦布苏病毒感染的防制 12 1．6．1预I坊 ．．12 1．6．2药物治疗 14 1．7关于垂直传播 14 1．7．1垂直传播的概念及方式 ．．14 1．7．2黄病毒垂直传播 ．15 1．8本研究的目的和意义 16 2材料和方法 。17 2．1试验材料 17 2．1．1主要仪器 ．．17 2．1．2主要试剂 17 万方数据 2．1．3种蛋、鸭胚及雏鸭 2．1．3种蛋、鸭胚及雏鸭 18 2．1．4毒种及试验动物 18 2．2主要溶液的配置 18 2．2．1琼脂糖凝胶电泳相关溶液 18 2．2．2原核表达相关溶液 ．1 8 2．2．3间接ELISA检测方法相关溶液 19 2．3自然感染病例种鸭、种蛋、鸭胚、雏鸭中TMUV的检测 ．19 2．3．1发病种鸭病毒分离与鉴定 20 2．3．2主要器官病理切片的制作 24 2．3-3种蛋孵化和病原检测 25 2．4 TMUV垂直感染动物模型的建立 27 2．4．1人工感染动物试验 27 2．4．2种蛋孵化和样品采集 27 2．4．3种蛋、鸭胚、雏鸭中TMUV分离与鉴定 。27 2．5 TMUV对种鸭的致病性研究 28 2，5，1人工感染试验 28 2．5．2样品检测 。28 3结果 。31 3．1自然感染病例种鸭、种蛋、鸭胚、雏鸭中T