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细胞化学染色 Cytochemical stain 概 念 细胞化学染色是以细胞形态学为基础，结合运用化学反应的原理对血细胞内的各种化学物质（糖类、蛋白质、脂类、酶类、铁、核酸等）作定性、定位、半定量分析的方法。 细胞原位的化学反应 临床应用 辅助判断急性白血病的细胞类型 辅助血液系统等疾病的诊断和鉴别诊断（Fe、NAP等） 过氧化物酶染色（POX)、苏丹黑染色（SBB) 过碘酸-雪夫反应（PAS）又称糖原染色 酯酶染色 酸性磷酸酶染色（ACP) 铁染色 中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP） 过氧化物酶染色( peroxidase，POX )  苏丹黑染色 ◆原理：SBB能溶解于细胞内的含脂结构，使脂类物质显示出来，呈棕黑色或深黑色。 ◆正常细胞的染色反应　同POX染色。 ◆临床评价 POX染色特异性高于SBB染色 SBB染色敏感性高于POX染色 　　　　　　乙二醇基（多糖类物质中） 　　　　　　　　过碘酸 　　　　　　双醛基＋无色品红 　　　　　　　　　紫红色化合物 ◆红细胞系统疾病 红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征中幼红细胞可阳性（均匀红色或块状）；某些红系良性疾病如缺铁贫、巨幼贫等阴性。 ◆白细胞系统疾病 ALL：（原幼淋细胞阳性率升高，呈粗颗粒或块状） 急粒：少数原粒呈阳性，阳性细颗粒状 急单：可呈阳性，阳性细颗粒状 PAS临床意义 α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE) 原理 α-醋酸萘酚 PH中性 α-醋酸萘酚酯酶 α-萘酚+重氮盐(坚牢蓝B) (黑色或灰黑色) α-NAE对诊断急性白血病的作用 铁+亚铁氰化钾 酸性环境 亚铁氰化铁（蓝色） Kaplow偶氮偶联法：中性粒细胞胞质中的碱性磷酸酶在PH9.6的碱性条件下能水解磷酸奈酚钠底物，生成奈酚，后者与偶氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀定位于胞质中的酶活性处。（紫黑色颗粒） 钙-钴法：红色颗粒 AML-M7 M7 PAS(+) PAS染色的应用 ◆鉴别淋巴系统增生的性质： 凡恶性增生时PAS反应多呈强阳性反应，见于急、慢性淋巴细胞白血病、淋巴瘤等。 ◆鉴别红系增生的性质： 凡恶性增生者， 如红血病、红白血病其原、幼红细胞多 呈强阳性反应；增生性贫血、巨幼贫， PAS多为阴性。 ◆有助于巨核细胞白血病的诊断 酯酶染色 正常血细胞的染色反应 ◆单核细胞、粒细胞、淋巴细胞（均可+） ◆仅单核细胞的阳性可被氟化钠抑制(NaF抑制率50%)。 NaF抑制率=抑制前的阳性率/积分-抑制后的 抑制前的阳性率/积分 ×100% 酸性磷酸酶染色 Acid phosphatase, ACP ACP染色的临床意义 铁染色 Ferric stain 染色原理（Fe染色） 正常血细胞的染色反应 ◆正常人骨髓中的铁主要存在于骨髓小粒及幼红细胞中，分为细胞外铁和细胞内铁。 ◆细胞外铁：骨髓小粒的巨噬细胞中 ◆细胞内铁: 中幼红细胞、晚幼红细胞 及红细胞中 铁粒幼红细胞--含铁颗粒的中、晚幼红细胞 铁粒红细胞--含铁颗粒的红细胞 细胞外铁的观察 低倍镜观察骨髓小粒中的铁，阳性结果呈弥散性、颗粒状、小珠状或块状蓝色。 细胞内铁的观察 5 3 5 3 环形铁粒幼细胞 参考范围： 细胞外铁： （+）～（++） 细胞内铁：铁粒幼红细胞12% ～44%，以Ⅰ型为主，少数为Ⅱ型，无环形铁粒幼红细胞及铁粒红细胞。 临床意义 MDS 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 Neutrophilic alkaline phosphatase NAP 染色原理（NAP染色） 正常血细胞的染色反应 ◆NAP主要存在于中性成熟粒细胞（包括中性杆状核粒细胞和中性分叶核粒细胞）胞浆内，故中性成熟粒细胞胞浆呈阳性，其他细胞基本呈阴性。 * * 成都市第六人民医院检验科 李色 FAB ALL（急性淋巴细胞白血病）L1、L2、L3 AML（急性髓细胞白血病） M0 急性粒细胞白血病（微分化型） M1 急性粒细胞白血病（未成熟型） M2 急性粒细胞白血病（部分成熟型） M