毛细管气相鸿色谱分析法.ppt

色谱分析 ——研究生 主讲：赵怀清 第一节 毛细管色谱柱的分类 一、毛细管色谱柱的分类 涂壁开管柱（WCOT) 开管柱 壁处理毛细管柱(WTOT) 毛细管柱 填充柱 填充毛细管柱 微型填充柱 二、 毛细管柱速率理论 （一）纵向扩散项 峰展宽主要由气相分子扩散引起的。 B = 2Dm （二）传质阻抗项 1.气相传质阻抗 2. 液相传质阻抗 与填充柱速率理论比较： （1）毛细管柱中，A=0 （2）在毛细管柱中，因无填料，因此，阻碍因子γ=0 （3）在毛细管柱中，以柱半径r代替填料颗粒直径dp，且Cs一般比填充柱小，气相传质阻抗常为色谱峰展宽的重要因素。 三、 速率方程讨论 （一）最小理论塔板高度 （二）最佳适用载气线速度 从速率方程可知，最小板高时的最佳流速： 例1 用内径为0.25mm的毛细管柱进行分析，样品为正庚烷。载气为氮气。正庚烷在氮气中的扩散系数Dm＝0.038cm2/s。 当k=0时，uopt=21.0cm/s； 当k=5时，uopt=7.3cm/s； 当k=∞时，uopt=6.4cm/s。 载气为氢气。正庚烷在氢气中的扩散系数 Dm＝0.095cm2/s。 当k=0时，uopt=52.4cm/s； 当k=5时，uopt=18.2cm/s； 当k=∞时，uopt=16cm/s。 当用氮气为载气时，要得到最小理论塔板高度，所需最佳流速比较小； 当用氢气为载气时，要得到最小理论塔板高度，所需最佳流速比较大。 计算出来的uopt很小，分析时间就要长，所以实际操作时，载气的流速要高于uopt。 研究表明，使用比uopt更高一些的载气流速，并使用较长一些的色谱柱，以补偿因流速增加而降低了的柱效，这样就会节省分析时间。 例2 100ft(1ft=0.3048m)长，内径0.5mm毛细管柱，H2作载气，uopt=16cm/s（正庚烷），如果线速度增加一倍，则洗脱时间减半，板高只增加25％，如果柱长增加25％以保持同样柱效和分离度，则分析时间可缩短5/8。 四、 毛细管色谱操作条件的选择 （一）毛细管柱的直径 已知柱效与柱内径成反比，即柱内径越细，柱效越高。 目前，多采用细内径，短毛细管柱进行快速分析。 （1）一般内径250μm的柱，样品容量约为100ng，而30μm柱，样品容量低于1ng。样品容量低，对仪器要求苛刻，检测器的敏感度要小于10－11g／s。 （2）整个系统的流失、污染和鬼峰都要尽量排除。 （3）检测器的死体积要小，要加尾吹气。当尾吹气为30ml/min时，对250μm柱，检测器死体积大于25μl，会引起1％峰展宽。对30μm柱，检测器死体积超过10ml，就会引起1％峰展宽。 （4）检测器时间常数，对250μm柱，时间常数为50ms，就会引起1％峰展宽；30μm柱，时间常数为25ms就会引起1％峰展宽。而且随柱内径继续减小，所需时间常数急剧下降。 （5）样品容量低，采用冷柱上样比较困难，而且分流进样时，需要很大的分流比，因此必须注意分流线性及定量失真问题。 （6）载气流量小，柱口压力大（约15大气压），目前仪器难以解决。 目前100～300μm、口径大于500μm的毛细管柱。目的是让色谱柱能够与一些死体积大的检测器如TCD、ECD、PID、Hall电导、MS与IR等匹配，可以方便地采用柱上进样方法，还能收集一些组分作进一步鉴定用，以代替填充柱使用。 （二）载气的选择 根据以下三个因素选择载气： （1）分离效能和分析速度； （2）检测器的适应性和灵敏度； （3）载气的物理化学性质，如柱压降、安全性、纯度和价格等。 在毛细管柱色谱中，常用H2、N2和He，不同的载气对Golay曲线的影响如下图。 从曲线极小值和它的平坦程度可以看出：H2作载气时，它的最佳柱效和N2差不多，可是它的最佳载气线速度却比N2大4倍。所以多采用H2作载气。 （三）液膜厚度 液膜厚度增加，会使柱效降低。液膜厚度需按分析要求来决定。 （1）分离挥发性低、热稳定性差的物质时，需用薄液膜柱。这样可以降低柱温和减少柱流失，对快速分析液膜厚度可低至0.05μm。 （2）分析高挥发性、保留值小的物质时，液膜厚度要大于1μm。 （3）液膜厚度还与毛细管柱的内表面性质、固定液的黏度、固定液的扩散系数和极性等有关系。 有些固定液如SE-30，液膜增厚对柱效影响不大；有些固定液如OV-225，液膜增厚对