第二章 核酸优的化学.ppt

（二）DNA的双螺旋结构 1953年，Watson 和Crick 提出。 （三）DNA的三级结构 线形分子、双链环状(dcDNA)→超螺旋、 2、染色体包装 生物体内的核酸通常都与蛋白质结合形成复合物，以核蛋白（nucleoprotein）的形式存在。　DNA分子十分巨大，与蛋白质结合后被组装到有限的空间中。基因组DNA与蛋白质结合形成染色体（染色质）。 压缩比：DNA分子长度与组装后特定结构长度之比。在细胞不同时期，其压缩比不一样 染色体包装的结构模型 多级螺旋模型 压缩倍数 7 6 40 5 （8400） DNA → 核小体 → 螺线管 → 超螺线管 → 染色单体 2nm 10nm 30(10)nm 400nm 2~10μm 一级包装 二级包装 三级包装 四级包装 （六）分子杂交 ：在退火条件下，不同来源的DNA互补区形成氢键，或DNA单链和RNA链的互补区形成DNA-RNA杂合双链的过程。 探针：用放射性同位素或荧光标记的DNA或RNA片段。 原位杂交技术：直接用探针与菌落或组织细胞中的核酸杂交，未改变核酸所在的位置。 点杂交：将核酸直接点在膜上，再与核酸杂交。 Southern印迹法：将电泳分离后的DNA片段从凝胶转移到硝酸纤维素膜上，再进行杂交。 Northern印迹法：将电泳分离后的RNA吸印到纤维素膜上再进行分子杂交。 DNA双螺旋的不同构象 Z-DNA B-DNA A-DNA B-DNA与A-DNA 染色体包装 螺旋和超螺旋电话线 螺旋 超螺旋 L=25,T=25,W=0 松弛环形 1 15 20 10 5 23 L=23,T=23,W=0 解链环形 1 5 10 15 20 23 1 5 10 15 20 25 L=23,T=25,W=–2负超螺旋 1 21 4 8 23 16 13 1 5 10 15 20 23 右手旋转拧松两匝后的线形DNA 1、DNA超螺旋的形成 DNA超螺旋结构形成的意义 ? 使DNA形成高度致密状态从而得以装入核中； ?推动DNA结构的转化以满足功能上的需要。如负超螺旋分子所受张力会引起互补链分开导致局部变性，利于复制和转录。 密度大，凝胶电泳中移动速度快。 组蛋白与DNA的结合 核小体 DNA的念珠状结构 核小体盘绕及染色质示意图 真核生物染色体DNA组装不同层次的结构 DNA （2nm） 核小体链（ 11nm，每个核小体200bp） 纤丝（ 30nm，每圈6个核小体） 突环（ 150nm，每个突环大约75000bp） 玫瑰花结（ 300nm ，6个突环） 螺旋圈（ 700nm，每圈30个玫瑰花） 染色体（ 1400nm， 每个染色体含10螺旋圈） 四、DNA与基因组 DNA Transcription RNA （mRNA、tRNA、rRNA） Translation Protein 基因 基因是DNA片段的核苷酸序列，DNA分子中最小的功能单位。 结构基因 调节基因 基因组 （一）DNA与基因 （二）原核生物基因组的特点 1. DNA大部分为结构基因，每个基因出现频率低。 2. 功能相关基因串联在一起，并转录在同一mRNA中（多顺反子）。 3.有基因重叠现象。 A B C D E F G 原核细胞mRNA的结构特点 5′ 3′ 顺反子 顺反子 顺反子 插入顺序 插入顺序 先导区 末端顺序 （三）真核生物基因组的特点 1. 重复序列 单拷贝序列 ：在整个DNA中只出现一次或少数几次，主要为编码蛋白质的结构基因。 中度重复序列 ：在DNA中可重复几十次到几千次。 高度重复序列 ：可重复几百万次 高度重复序列一般富含A-T或G-C，富含A-T的在密度梯度离心时在离心管中形成的区带比主体DNA更靠近管口；富含G-C的更靠近管底，称为卫星DNA（satellite DNA） 富含A-T 富含G-C 主体DNA 2. 有断裂基因 mRNA 顺反子1 872bp 内含子（intron)：基因中不为多肽编码，不在mRNA中出现。 A B C D E G 7 700bp F 外显子（exons）：为多肽编码的基因片段。 ：由于基因中内含子的存在。 例外：组蛋白基因(histongene)和干扰素基因(interferon gene)没有内含子。