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第十四章 蛋师白质的生物合成

第十四章 蛋 白 质 的 生 物 合 成 主要内容 信使RNA和遗传密码 核糖体 转移RNA的功能 蛋白质生物合成的机制 真核生物与原核生物蛋白质合成的差异 蛋白质合成后加工 蛋白质生物合成 一、信使RNA和遗传密码 mRNA与遗传信息的传递 遗传密码的破译 遗传密码的特性 2、核糖体结合技术 第二个实验(核糖体结合技术)是1964年也是由美国的M.Nirenberg等人完成的。他们首先合成一个已知序列的核苷酸三聚体,然后与大肠杆菌核糖体和氨酰tRNA一起温育。由此确定与已知核苷酸三聚体结合的tRNA上连接的是那一种氨基酸。该实验对于几种密码编码同一个氨基酸提供了直接的、最好的证据(下图B)。 3、核苷酸的人工合成技术 (三)遗传密码的特点 ⑴密码子的方向性 密码子(mRNA上由三个相邻的核苷酸组成一个密码子,代表肽链合成中的某种氨基酸或合成的起始与终止信号) 的阅读方向及它们在mRNA由起始信号到终止信号的排列方向均为5?-3’,与mRNA链合成时延伸方向相同。 ⑵密码子的简并性 64-3=61个代表20种氨基酸,仅甲硫氨酸、色氨酸只有一个密码子。一个氨基酸可以有几个不同的密码子,编码同一个氨基酸的一组密码子称为同义密码子。这种现象称为密码子的简并性。 ⑶密码子的连续性(读码)(无标点、无重叠) 从正确起点开始至终止信号,密码子的排列是连续的。既不存在间隔(无标点),也无重叠。在mRNA分子上插入或删去一个碱基,会使该点以后的读码发生错误,称为移码,由这种情况引起的突变称为移码突变。 ⑷密码子的基本通用性(近于完全通用) 对于高等、低等生物都适用.有例外,一些原核生物中利用终止密码翻译AA(UGA-Trp(色)\硒代半胱氨酸) 二、核糖体 核糖体是蛋白质合成的工厂。 (一)核糖体的组成和结构: 1、组成: 60-65%rRNA, 30-35%蛋白质。 2、结构: 球形颗粒,由大小二个亚基组成。 电镜下的核糖体大小亚基 原核与真核核糖体的主要区别 原核 真核 直径大小 18 nm,70S 20-22nm,80S 细胞质中部位 与mRNA结合 与内质网结合、 线粒体、叶绿体 数量/细胞 15000 106-107 (二)核糖体的功能: 1、16S rRNA对识别mRNA上肽链起始位点起重要作用。 2、参与肽链的启动、延长、终止、移动等 3、功能位点: 1) mRNA结合位点: 大小亚基的结合面上, 为蛋白质合成处。 2)P位点: 肽酰-tRNA结合位点,起始-tRNA和肽酰基-tRNA结合位点。 3)A位点: 氨酰-tRNA结合位点。 三、转移RNA的 功能 (一)结构: 二级结构:三叶草; 三级结构:倒“L”。 (二)与蛋白质合成有关的位点: 1、反密码子位点:由密码子环下方的3个碱基组成,与mRNA上密码子的碱基互补。 2、3’末端的CCA序列:为aa接受位点,aa共价结合到A残基上。 3、识别aa-tRNA合成酶的位点: 4、核糖体识别位点。 (三)功能 1、有携带aa的功能; 具倒L型三级结构的tRNA在ATP和酶作用下,可与特定aa结合。 2、有接头作用: 氨酰-tRNA凭借自身的反密码子,依靠核糖体的特定位点识别mRNA的密码子并以碱基配对方式与之结合的作用。 将aa带到肽链的一定位置。 3、近年的研究 1)第二遗传密码系统的破译: 第二遗传密码系统: ①将tRNA分子上的某个碱基或bp可决定tRNA携带专一aa的作用;  ② aa-tRNA合成酶和tRNA之间的相互作用称为-。 由此认为:tRNA也储存遗传密码, 如:Lys- tRNA的aa接受臂上的 G3·G70→ G3 ·U70取代时,可接受Ala(丙) tRNA中的识别碱基 2、人工合成的小螺旋结构可携带aa 由此说明: tRNA携带aa 并不一定需要完整的分子结构。 四、蛋白质生物合成的分子机制 概念: mRNA解读方向: 5’ →3’ 肽链延伸方向: 从N端向C端进行。 过程: (1) aa的激活; (2

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