第2章核酸的儿结构与功能.pptVIP

第 二 章核酸的结构和功能 Structure and Function of Nucleic Acid 在1869年，F. Mischer从细胞核中分离得到一种含磷很高的强酸性物质，即现在被称为核酸的物质。 1944年 Avery等人通过细菌转化试验证明了DNA是遗传物质。 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1958 Crick提出遗传信息传递的中心法则 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 五种碱基都能形成酮式-烯醇式或氨基-亚氨基的互变异构。这两种异构体的平衡关系受介质酸碱环境的影响。 二、核酸的一级结构 定义 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所以也称为碱基序列。 DNA 与RNA的区别 已知的核酸化学数据 （三）DNA双螺旋结构的多样性 B型DNA双螺旋是核酸二级结构的重要形式。当改变了溶液的离子强度和相对湿度时，DNA螺旋结构可以改变，除B型外，还有Z型及A型。 在体内，不同构象的DNA可能与基因表达的调控有关。 三种类型DNA双螺旋的比较 真核生物染色体DNA组装不同层次的结构 螺线管再经几次卷曲才能形成染色单体。人类细胞核中有46条染色体，这些染色体的DNA总长达1.7m，经过这样的折叠压缩，46条染色体总长亦不过200nm左右。 三、DNA的功能 肺炎双球菌的转化实验 1928年，格里菲斯：实验表明加热杀死的S型细菌把某些R型细菌转化为S型细菌，S型细菌有一种物质或转化因素进入了R型细菌，使之产生了荚膜，从而具备了毒性。 1944年，艾弗里和他的同事经过10年努力，在离体条件下完成了转化过程，证明了引起R型细菌转化为S型细菌的转化因子是DNA。 实验二，噬菌体的标记实验 T2噬菌体是一种专门寄生在细菌体内的病毒，约由60％的蛋白质和40％的DNA组成。蛋白质构成它的外壳，DNA藏在头部，当一个T2噬菌体感染细菌后，在菌体内形成大量噬菌体，菌体裂解，释放几十个至几百个跟原来一样的噬菌体。那么T2噬菌体的遗传物质究竟是蛋白质还是DNA呢? 噬菌体T2结构 * tRNA的一级结构特点 含稀有碱基较多 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 由70~90个核苷酸组成 tRNA的三级结构—倒L形 三、rRNA的结构与功能 rRNA是细胞中含量最多的RNA，占总量的80%。rRNA与蛋白质一起构成核蛋白体，作为蛋白质生物合成的场所。 解链曲线：在连续加热DNA的过程中以温度对A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。 　热变性的DNA在复性过程中，具有碱基序列部分互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化双链的现象。 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究 的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研 究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情，用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑 PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。(类似于半保留复制) PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性 ；②模板DNA与引 物的退火(复性) ；③引物的延伸 复习题 1、概念（1）核酸的一级结构 （2）解链温度（Tm） （3）DNA分子变性 （4）核酸分子杂交 2、碱基与核糖、核糖与磷酸及核苷酸之间各以何种键连接？ 3、简述RNA与DNA的主要不同点。 4、B型DNA 双螺旋结构要点。 5、真核生物mRNA的结构特点。 6、tRNA一、二、三级结构各有哪些特点？ 7、试述RNA的种类及其主要功能。 第五节 核 酸 酶 Nuclease mRNA核内向胞质的转位 mRNA的稳定性维系 翻译起始的调控 帽子结构和多聚A尾的功能 mRNA的功能：作为蛋白质合成的模板。 二、转运RNA的结构与功能 稀有碱基 * tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 额外环 5’ 3’ * tRNA的三级结构 —— 倒L形 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 * tRNA的功能 活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 核糖体的组成 49种 33种