第4章蛋前白质的化学.pptVIP

预习重点： 1.蛋白质的功能 2.氨基酸组成、分类、两性解离 3.氨基酸的分离分析 4.蛋白质的一级结构、肽键和肽链 5.维持蛋白质构象的化学键 6.蛋白质的二级结构 7.蛋白质的结构与功能 学习难点 ： 1.谷胱甘肽 2.蛋白质一级结构的测定 3.基序、三级结构、四级结构 4.蛋白质合成基本原理 5.蛋白质的性质 6.蛋白质分离纯化 7.蛋白质纯度鉴定 凯氏定氮法测定蛋白质含量: （三）、氨基酸的化学性质 ①.两性解离 ②.紫外吸收 氨基酸的分离与分析 自动氨基酸分析仪 1.蛋白质完全酸水解 2.水解液于PH 2上样于钠型阳离子交换柱 3.用PH 3.5 0.2mol/L柠檬酸钠溶液洗脱 4.用PH 4.25 0.2mol/L柠檬酸钠溶液洗脱 5.分析洗脱谱上各峰的位置和面积，与标准氨基酸图谱比较分析 P66 二.蛋白质的一级结构测定 1.氨基酸组成的分析 ⑴蛋白质样品的纯化 ⑵蛋白质分子中多肽链数目的测定 ⑶氨基酸组成的分析： ①氨基酸自动分析仪 ②含多个亚基的蛋白质，先纯化为单 个亚基，再测定每个亚基氨基酸组成 N末端氨基酸分析 A.二硝基氟苯（DNFB）法：P70 B.二甲氨基萘磺酰氯法（DNS-Cl）灵敏度：1?10-9mol。 A.肼解法: 大分子多肽氨基酸顺序的确定：裂解 A.化学裂解法：溴化