健膝丸对大鼠膝骨关节炎组织形态学的影响.doc

摘要 摘要 目的：观察健膝丸对实验大鼠膝骨关节炎组织形态学的影响，探讨其治疗骨关节 炎的作用机理，为临床运用以及进一步探索骨关节炎的发病机制提供依据。 方法：将 40 只大鼠随机区组法分为正常组、模型组、实验组（健膝丸组）、对照 组（抗骨增生胶囊组），每组 10 只。正常组假手术处理，模型组、实验组、对照 组按照改良 Hulth 方法建立动物模型，切断大鼠右下肢膝关节内侧副韧带、摘除 内侧半月板及切断前后交叉韧带，术后不固定伤肢，自由活动。1 周后开始每天 强迫大鼠活动 0.5 小时，连续 8 周，复制膝骨关节炎实验动物模型。术后 1 周在 造模的同时开始用药，实验组以健膝丸 1.35g/kg 灌胃，对照组以抗骨增生胶囊 g/kg 灌胃，正常对照组和模型对照组则给予等体积的 0.9 %生理盐水，每日 1 次，连续 8 周。治疗 8 周后，处死动物，解剖右膝关节，取股骨内髁关节软骨 及部分软骨下骨标本，分别经 HE、Masson、Safranin-O 染色，光镜观察并行 Mankin’s 评分。 结果：HE 染色显示，正常组关节软骨和软骨下骨组织形态基本正常。模型组软 骨表面粗糙不整，表层软骨纤维化变性，出现裂隙深达移行层，软骨表面糜烂、 完全剥落，形成缺损区，软骨下骨裸露，软骨细胞数量增加明显，有簇集现象， 各层肥大软骨细胞增多，出现大量空软骨陷窝；软骨细胞排列紊乱，四层结构分 辨不清晰，可见多重潮线或潮线中断；部分切片可见明显的软骨下骨硬化或囊性 变形成，边缘有丘状隆起的骨赘，骨小梁增粗。实验组关节软骨破坏较模型组明 显减轻，表面欠光滑，表层软骨细胞丢失，可见软骨层变薄，软骨膜缺如，表层 软骨纤维化变性，出现浅表裂隙，深层可见肥大软骨细胞，出现空软骨陷窝；细 胞排列尚整齐，四层结构尚清晰，潮线基本完整；无明显的软骨下骨硬化或囊性 变。对照组大体同实验组，但其比实验组出现较多的空软骨陷窝。 Masson 三色染色显示，正常组软骨基质胶原染蓝绿色，着色均匀，向潮线方 向染色加深；软骨下骨板及骨小梁深染绿色，骨胶原深染红色，呈红绿相间。模 型组软骨表层变性，软骨失染。实验组软骨表层及移行层染色浅淡，部分区域染 色不均匀，潮线附近有火焰状升起的红染。对照组与实验组相比，潮线附近有火 焰状升起的红染，颜色较重。 Safranin-o-fast green-iron 染色显示，正常组软骨蛋白多糖红染均匀，无失染； 模型组全层软骨失染；实验组染色变淡，染色不均匀；对照组染色较淡，有失染。 Mankin’s 评分结果显示，与正常组比较，模型组、实验组、对照组积分显著 增加（P0.05）；与模型组比较，对照组、实验组积分减少显著（P0.05）；实验 1 健膝丸对大鼠膝骨关节炎组织形态学的影响 组与对照组软骨组织损伤积分差异无统计学意义（P0.05）。 结论：通过对实验大鼠膝骨关节炎组织形态学观察，实验组、对照组均出现软骨 退变表现，与正常组之间存在差别，但与模型组相比，软骨退变程度较轻，Ⅱ型 胶原和蛋白多糖丢失较少，软骨下骨硬化不明显。说明健膝丸可减少软骨Ⅱ型胶 原和蛋白多糖丢失，减轻关节软骨破坏，减缓软骨下骨硬化，延缓骨关节炎的发 展进程，但同时表明其不能停止或逆转关节软骨的退变；模型组较其它三组软骨 下骨硬化明显，说明骨关节炎的严重程度与软骨下骨的变化有关。 关键词：骨关节炎；健膝丸；中医药疗法；关节软骨；组织形态学；实验研究 2 英文摘要 Histological effect of Jianxi pill on knee osteoarthritis in rats Li Jian（Orthopaedics and Trauma of Traditional Chinese Medicine） Directed by Professor Lou Yuqian Abstract Objective: To observe the histolcgical effect of Jianxi pill on cartilage in the model of osteoarthritis(OA) and explore its therapeutic mechanism. Methods: 4-month-old Sprague Dawley rats were divided randomly into 4 group:the normal group,the model group,the experimental group(Jianxi pill group) and the control group(Kangguzengsheng capsule group),10 for each group.The normal grou