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基质和说膜系统
第四章细胞基质和内膜系统 第一节细胞质基质(cytoplasmic matrix ) 细胞质基质:是细胞的重要的结构成分,其体积约占细胞质的一半 ,均质半透明的胶体状物质。含细胞骨架。 胞质溶胶:用差速离心分离细胞匀浆物组分,先后除去细胞核、线粒体、溶酶体、高尔基体和细胞质膜等细胞器或细胞结构后,存留在上清液中的主要是细胞质基质成分。生物化学家称之为胞质溶胶。常常认为胞质溶胶内不含细胞骨架,是一些中间代谢有关的酶。 Paine的乳胶小球实验:将小球注入非洲爪蟾的卵母细胞中,取出后发现其中80%的多肽没有进入,此外还有mRNA核糖体等,说明多数蛋白等结合在细胞骨架上。 ? 成分:中间代谢有关的酶类、细胞骨架结构。 小分子物质:水、无机粒子(Na+、K+、Ca+、Mg+等) 中等分子:脂类、氨基酸、核苷酸等 大分子物质:蛋白质、RNA、脂蛋白、多糖等 ?特点:细胞质基质是一个高度有序的体系;通过弱键而相互作用处于动态平衡的结构体系。 ? 完成各种中间代谢过程 如糖酵解过程、磷酸戊糖途径、脂肪酸合成等. ? 作为细胞器的微环境,为维护细胞器正常结构和生理活动提供所需要的生理环境;同时也为细胞器的功能活动提供底物。 另:蛋白质的修饰、蛋白质选择性的降解 ? 蛋白质的修饰 ? 控制蛋白质的寿命 ? 降解变性和错误折叠的蛋白质(泛素ub,2004年诺贝尔奖) ? 帮助变性或错误折叠的蛋白质重新折叠 第二节细胞内膜系统 细胞内膜系统是指细胞内在结构、功能及发生上相关 的由膜包绕形成的细胞器或细胞结构。 主要包括:内质网、高尔基复合体、溶酶体、以及细胞核。 一、细胞内膜系统的研究方法 De Duve, A.Claude and G.Palade,1974 Nobel Prize 放射自显影(Autoradiography) 二 内 质 网(endoplasmic reticulum,ER) 比较rER和sER 内质网的化学组成和结构 ER 的 功 能 ER是细胞内蛋白质与脂类合成的基地,几乎全部脂类和多种重要蛋白都是在内质网合成的。 rER 的 功 能 ? 蛋白质的合成 ? 蛋白质的修饰与加工 ?新生肽的折叠与组装 蛋白质合成 Er上核糖体合成的: secretory proteins;integral membrane proteins, soluble proteins of organelles. 分泌蛋白;整合膜蛋白;内膜系统各种细胞器内的可溶性驻留蛋白(如溶酶体酶)等 在细胞质基质中“游离”核糖体上合成的: 细胞质基质中的驻留蛋白(如糖酵解酶和细胞骨架蛋白);质膜外周蛋白;核输入蛋白;转运到线粒体、叶绿体和过氧物酶体的蛋白。 Cell-free system中蛋白质的翻译与SRP、DP和微粒体的关系 蛋白质分选与分选信号 高尔基体在细胞内膜泡蛋白运输中起重要的枢纽作用 分子“伴侣”(molecular chaperones) 细胞中的某些蛋白质分子可以识别正在合成的多肽或部分折叠的多肽并与多肽的某些部位相结合,从而帮助这些多肽转运、折叠或装配,这一类分子本身并不参与最终产物的形成,因此称为分子“伴侣”。 新生肽的折叠与组装 ? 新生肽的折叠组装:非还原性的内腔,易形成二硫键; ? 正确折叠:具有一定信号,在二硫键异构酶帮助新合成的蛋白重新形成二硫键 ? 分子伴侣:(chaperone)具有折叠酶的功能,能识别蛋白折叠后的疏水面并与之结合,防止错误折叠;参与蛋白质跨膜运输后分子的重折叠以及装配.属于热休克蛋白(HSP)进化保守. 蛋白质的加工 修饰加工:糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等 (二)高尔基复合体(Golgi complex) ? 化学组成及结构 ? 高尔基体的功能 ? 高尔基体与细胞内的膜泡运输 1、高尔基体的化学组成和结构 化学组成:主要由脂类、蛋白质及多糖物质组成。 其标志性酶为糖基转移酶。 结构:电镜下单位膜围成的扁平囊状结构堆叠在一起,周围结合有些小管或大小不等的小囊泡构成高尔基复合体。 高尔基体是有极性的细胞器:位置、方向、物质转运与生化极性 ?高尔基体顺面网状结构(CGN) ER的转运膜泡与之融合,在其中内容物进行分类后,大部分送入中间膜囊,小部分蛋白质和脂质运回ER. ?高尔基体中间膜囊(medial Golgi) 多数糖基修饰; 糖脂的形成; 与高尔基体有关的多糖的合成 ?高尔基体反面网状结构(TGN) 分类包装,“晚期”蛋白质修饰 ?周围大小不等的囊泡 反面体积较大的分泌
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