需氧革兰阳性杆菌与检验.pptVIP

有毒株在NaHCO3血琼脂平板上置5%CO2环境中培养18～24h，可产生荚膜，菌落由粗糙型变为粘液型，而呈现半圆形，突起，有光泽的菌落。以接种针挑取时呈拉丝状，此为鉴别菌落要点，而无毒株则形成粗糙型菌落。 标本采集 标本采集 　病人血液、痰、粪便、渗出液、脑脊液等。 　死亡病畜标本：死于败血症的动物，严禁宰杀、解剖，可在消毒皮肤后割取耳朵、舌尖、采集少量血液。 　污染物品：皮革、兽毛、土壤等。 标本处理：无杂菌污染标本直接接种，有杂菌污染标本先加热杀死繁殖体和杂菌再接种。 已处理标本 直接涂片 增菌培养 分离培养 Ascoli试验 革兰染色 荚膜染色 初步报告 　　血平板 戊烷脒琼脂平板 可疑菌落 菌落涂片 染色镜检 鉴定试验 肉汤培养 动物实验 动物死亡 分离培养 ●噬菌体裂解 ●串珠试验 ●青霉素抑制试验 检验方法 在芽胞杆菌属中，除蜡样芽胞杆菌毒素对动物有致病作用外，炭疽芽胞杆菌是唯一具有致病力者。 炭疽芽胞杆菌与其它需氧芽胞杆菌的鉴别 鉴别项目 炭疽芽胞杆菌 枯草芽胞杆菌 蜡样芽胞杆菌及其它需氧芽胞杆菌 形态 菌体两端平整或凹陷 两端钝圆 两端钝圆 荚膜 + - - 动力 - + + 菌落 有小突起，边缘呈卷发状，粘稠菌落 锯齿状粗糙菌落 蜡样或粗糙不粘稠菌落 肉汤 絮状沉淀，上层清晰 均匀混浊有菌膜 均匀混浊有菌膜 Ascoli + - - 溶血 不溶血或微溶血 + + 串珠试验 + - - 二．蜡样芽胞杆菌 形态与染色 革兰阳性大杆菌，两端较钝、链杆状，长短不一，有鞭毛，无荚膜，可形成芽胞。 * 培养特性 需氧或兼性厌氧，营养要求不高。 普通琼脂平板：可形成圆形、隆起、灰白色、不透明、R型蜡滴样大菌落。 血琼脂平板：菌落呈浅灰色，似毛玻璃状，菌落周围有α或β溶血。 第三节 产单核李斯特菌 * （一）形态与染色 革兰阳性小杆菌，直或稍弯，常呈V字形成对排列，有时呈丝状，偶尔可见双球状。 多数菌体一端较大，似棒状，易误认为是污染的类白喉棒状杆菌； 又因菌体短小，三、五成链，并有β溶血性，易与链球菌混淆，用触酶试验加以区别。 在22～25℃环境中形成4根鞭毛，故在25℃肉汤培养液中运动活泼；而在37℃时仅形成1根鞭毛，动力缓慢。 * （二）培养特性 需氧或兼性厌氧，营养要求不高。4～45℃均能生长，最适温度30～37℃。因在4℃能生长，故可进行冷增菌。 初时菌落极小似露珠状、光滑透明，通过侧光微显蓝绿色，37℃培养数日，菌落增大变成灰暗，血平板上的菌落有狭窄的β溶血环。 第四节 红斑丹毒丝菌 * （一）形态与染色 革兰阳性杆菌，单个或形成短链状，粗糙型菌落形成长丝状。无鞭毛，无荚膜，无芽胞。 （二）培养特性 厌氧或微需氧菌。初次分离需在厌氧环境中培养，传代后在有氧条件下也能生长。 二．致病性 红斑丹毒牡菌为红斑丹毒丝菌病的病原体。 主要发生在鱼类、家畜、家禽和兔类，人类也感染发病。 人接触动物或其产品经皮肤损伤而引起类丹毒。以局部感染为主，继而发展成淋巴管炎，可转变成关节炎。也可引起急性败血症或心内膜炎。 第五节 阴道加特纳菌 （一）形态与染色 本菌革兰染色视菌株和菌龄不同而异。本菌具有多形性，两端钝圆，无鞭毛，无荚膜，无芽胞。 * （二）培养特性 兼性厌氧菌，营养要求较高，在一般营养琼脂平板上不生长。 在含5%人血琼脂平板上置5%CO2，35～37℃培养24h后，形成针尖大小菌落；经48h后形成β溶血、圆形、光滑不透明的菌落。 二．致病性 阴道加特纳菌和厌氧菌在阴道内过度生长，造成阴道正常菌群微生态平衡失调，而引起非特异细菌性阴道病（BV）。 可导致妇产科多种严重并发症。如子宫全切术后感染、绒毛膜炎等。 本菌还能引起新生儿败血症和软组织感染。 * 并非GV阳性者都是BV，因为20～40%的正常妇女阴道也可检出此菌。 BV诊断标准： 阴道分泌物增多，稀薄均质灰白色，有恶臭味。 分泌物pH＞4.5～4.7。 分泌物胺试验阳性。 镜检有线索细胞。 * * * * * * * * * * 革兰阳性杆菌及检验 革兰阳性杆菌菌属间的鉴别 ? 棒状杆菌属 芽胞杆菌属 李斯特菌属 丹毒丝菌属 加特纳菌属 形态 棒状 杆菌有芽胞 短杆、链或丝状 细杆或丝状 杆菌、多形性 触酶 + + + - - 动力 - V + - - 对氧 需氧，兼性厌氧 需氧，兼性厌氧 兼性厌氧 兼性厌氧 兼性厌氧 ?V：炭疽芽胞杆菌阴性，其它芽胞杆菌阳性。 第一节 棒状