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实验二 油镜的使用和细菌形态的观察 实验目的 实验原理 实验材料 实验步骤 实验报告 一、实验目的 1. 学习并掌握油浸系物镜的使用方法 2. 利用油镜观察细菌的形态和特殊构造 二、实验原理 物 镜 显微镜、香柏油、镜头清洁液(二甲苯)、擦镜纸等。 变形杆菌、枯草杆菌、破伤风梭菌、园褐固氮菌、肺炎球菌等固定装片 * * * 人眼观察物体的能力是有限的。一般的情况下,人眼只能分辨相距0.1-0.2mm的两个物体。也就是说,当两个物体相距不到0.1mm的时候,人眼就会把它们看成是一个物体了。这个极限便称为人眼的分辨本领。 二、实验原理 低倍镜 高倍镜 油镜(OI) 镜头和玻片间以香柏油 代替空气 用香柏油取代空气的作用: ① 增加视野照明度,改善观察效果 空气 n=1.0 玻璃 n=1.50 香柏油 n=1.52 当光线从其它介质射入空气时,折射角大于入射角 物 镜 用香柏油取代空气的作用: 显微镜分辨率示意图 物 镜 0.5 λ 能分辨的最小距离(D)= ———— n sin θ 物 镜 0.5 λ 能分辨的最小距离(D)= ———— n sin θ 数值孔径(NA) n:玻片与物镜间介质的折射率 θ:为物镜镜口角的半数,它取决于物镜的直径和工作距离 低倍镜 高倍镜 油镜(OI) 物 镜 用香柏油取代空气的作用: ② 提高显微镜的分辨率 物 镜 肉眼分辨率一般只有 0.2mm 光学显微镜分辨率 0.2μm 电子显微镜可达 0.2nm 三、实验材料 四、实验步骤 (一)观察前的准备 将显微镜平稳置于实验台上,镜座距离实验台边约4厘米,坐正,练习用双眼观察。 (二)低倍镜观察染色装片 转动调节器至视野中出现清楚的物象为止。移动装片,将合适的观察部位移至视野中央。 四、实验步骤 (三)高倍镜观察 用细调节螺旋校正焦距使物像清晰为止,将最适宜观察部位移至视野中心。 (四)油镜观察 1. 在玻片的标本的镜检部位(镜头的正下方)滴一滴香柏油,将油镜转至正下方,使油镜浸在油中,镜头几乎与玻片接触,但不可压及玻片,以免损坏玻片和镜头; 2. 将聚光器升至最高并开足光圈,用细调节螺旋调节至物像清晰为止; 3. 如果镜台下降太快未找到物象,需从侧面注视,小心缓慢上升镜台,重新使镜头浸在油中,用粗调节螺旋将镜台下降(切忌反转调节器),当视野中出现物象时,再用细调节螺旋调节到物象清楚为止。 变形杆菌(示周生鞭毛) 鞭毛
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