玉米降血压肽lrp亲和吸附剂的设等计三制备及性能分析.docx

中文摘要中文摘要 中文摘要 中文摘要 玉米降血压多肽是从玉米水解液中提取的具有降血压作用的一类多肽，其中 LRP(Leu．Arg．Pro)是目前为止发现的降血压效果最好的血管紧张素酶抑制肽 ACEIP(IC50值为O．27州)。通过传统方法分离纯化LRP涉及多次色谱分离和 洗脱，工艺复杂且回收率极低。为了简化其分离难度，本文设计并制备了一系 列亲和吸附剂用于LRP的吸附分离，通过静态吸附实验对吸附剂结构进行了筛 选，并对其与LRP间的相互作用机理进行了初步研究。 本文首先以聚丙烯酰化氨基酸为配体，设计并制备了五种琼脂球基质的亲和 吸附剂(Agar-PTrp，Agar-PAsp，Agar-PHis，Agar-PGly,Agar-PLeu)，通过静态吸 附实验筛选出了同时具有较高吸附容量和较好的吸附选择性的聚丙烯酰化色氨 酸为配基的亲和吸附剂(Agar-PTrp)。同时考察离子强度、pH值、温度及乙醇 含量等因素对其吸附过程的影响，初步研究了Agar-PTrp对LRP的吸附机理。 结果显示：随着离子强度增强、乙醇含量增加或温度升高，Agar-PTrp对LRP 的吸附能力明显下降；且吸附结果受pH值影响显著，在强酸(pH3)或强碱 (pH10)时，吸附量较中性条件下显著降低。以上结果表明：Agar-PTrp对LRP 的吸附过程中存在静电作用和疏水作用。此外，通过动态吸附．洗脱实验实现了 于对LRP吸附分离和洗脱，其回收率高达96％。 为了研究高分子配体在吸附中的作用，本文还考察了配体形式(高分子配体 和小分子配体)对吸附剂性能的影响，通过静态吸附实验分别对其吸附动力学 及吸附热力学参数进行了研究。结果显示高分子配体亲和吸附剂的吸附能力均 高于相应的小分子配体亲和吸附剂，且Agar-PTrp和Agar-Trp对LRP的吸附均 符合Langmuir模型，Agar-PTrp吸附LRP为焓驱动过程，且分子呈有序排列的 趋势，Agar-Trp对LRP的吸附为熵驱动过程，体系分子混乱度增加。 基于本组前期关于天冬氨酸修饰交联环糊精吸附剂(Asp．CD)的工作，通 过静态及动态吸附实验研究了天冬氨酸修饰交联环糊精吸附剂(Asp．CD)对LRP 的吸附机理，结果显示：静电作用及其诱导的疏水包接是Asp．CD吸附LRP的 主要驱动力；等温吸附实验说明Asp．CD对LRP的吸附过程符合Langmuir模型， 熵焓值均有利于吸附。 关键词：亲和吸附剂高分子配体弱相互作用降血压多肽 l AbstractAbstract Abstract Abstract Corn antihypertensive peptide is a kind of peptide isolated from tom hydrolyzate, especially,LRP(1m-Arg-Pro)has the best antihypertensive effect,with its ICso value being about 0．27 pM．However,the conventional method for purifying LRP is ineffective due to the complex and repeated chromatographic separation．and elution． Therefore，series of affinity adsorbents were designed and prepared for purification of LRP．To simplify the separation process，and the adsorption mechanism was also investigated． Firstly,five kinds of affinity adsorbents based on high cross—linked Agarose and poly(N-acryloyl—amino acid)were designed and prepared．1he affinity adsorbents were screened by static adsorption experiments．Among these adsorbents，Agar-PTrp had the best capability for LRP adsorption with the adsorption capacity being about 12．4 m∥g．Effects of ionic strength,pH，temperature and ethanol existing were studied through st