一株鞘氨醇单胞菌tp-你5产生的韦兰胶及其性质研究.docx

摘要摘要 摘要 摘要 韦兰胶具有较高的剪切稀化性及优良的流变性能，主要作为增稠剂、悬浮 剂、乳化剂、稳定剂、润滑剂、成膜剂和粘合剂应用于工农业的各个方面。特 别是在食品、混凝土、石油、油墨等工业中有广泛的应用前景。鞘氨醇单胞菌 TP．5(Sphingomonas sp．TP．5．)能合成微生物胞外多糖韦兰胶(welan gum)。本文 优化了韦兰胶的发酵培养基，研究了韦兰胶的流变学性质及与其他胶复配的凝 胶特性，并验证了韦兰胶合成关键基因UDP．葡萄糖脱氢酶基因(ugdG)的功能。 以发酵产量、糖转化率、粘度为指标，采用单因素实验和响应面法对菌株 TP．5合成韦兰胶的发酵条件进行优化。在发酵培养基为蔗糖47．59／L、NaN03 4．5∥L、玉米浆1．09／L、MgS04 O．3∥L、Na2HP04·1 2H20 5．759／L、CaC03 1．59／L、 FeS040．0059／L时，多糖产量从原始发酵配方产量的17．Og／L提高到24．21∥L， 蔗糖转化率达到50．96％，糖转化率提高42％。 韦兰胶水溶液具有良好的耐温性和耐酸碱性。与黄原胶(xanthan gum)、结 冷胶(geIlan gum)、瓜尔豆胶(guar gum)或槐豆胶(10cust bean gum)等生物 胶复配后，能增加后者的粘度和耐温性。不同比例复配胶的粘度随温度的不同 而变化。 韦兰胶与结冷胶复配，在结冷胶浓度大于60％时，加热到85℃以上，可以 形成凝胶。韦兰胶与结冷胶或黄原胶复配，结冷胶或黄原胶浓度大于20％，在 加入大于的0．01mol／L CrCl3时，可以形成凝胶。此外还研究了韦兰胶与其它胶 复配，加热或加入CrCl3形成凝胶后，不同加热温度或不同CrCl3浓度所形成的 各配比复配胶的凝胶特性。 克隆了菌株TP．5的UDP．葡萄糖脱氢酶基因(ugdG)，表达及纯化了重组的 UDP．葡萄糖脱氢酶。研究了菌株TP．5中ugdG编码的UDP．葡萄糖脱氢酶 (切)PG．DH)的生化特征及生物学功能，证明编码的UDPG．DH具有葡萄糖脱 氢酶的活性，能催化UDP．葡萄糖转变为UDP．葡萄糖醛酸。生化分析表明，菌 株TP．5的UDP．葡萄糖脱氢酶酶活较高。当底物为UDP．葡萄糖时，Km值为0．86 mM；当底物为NAD+时，Kin值为0．36 mM。 关键词：鞘氨醇单胞菌韦兰胶培养基优化质构性质复配ugdG AbstractSphingomonas Abstract Sphingomonas sp．TP-5 synthesise microbial exopolysaccharides wdan gum．In this paper，we USe single factor experiments and response surface method to optimize the fermentation conditions of strain TP一5，according fermentation yield，sugar conversion rate and adhesiveness index．The fermentation medium is Sucrose 47．5 ∥L、NaN03 4．5 g／L、MgS04 0．3∥L、Na2HP04·12H20 5．759／L、CaC03 1．59／L、 FeS040．0059／L、0．0111 steep liquor 1．09／L．And polysaccharide production increased from the original yield fermentation of 17．09／L to 24．219／L，increasing rate of42％． Sucrose conversion rate reached to 50．96％．Optimization experiments greatly improved the conversion of sucrose，saving the cost of production． Welan gum solution has a good temperature resistance，acid and alkali resistance． When welan gum mixes with xanthan gum，gellan gum，guar gum or locust bean gum，it increases of the adhesiveness of a single gd．When proportion of different gum compound，such as konjac gum，xanth