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金黄色葡萄球菌spovg调控苯唑西林抗性的分子机制-微生物学专业论文.docxVIP

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金黄色葡萄球菌spovg调控苯唑西林抗性的分子机制-微生物学专业论文

优秀毕业论文 精品参考文献资料 摘要摘要 摘要 摘要 由甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(methicillin—resistant StaphyIococcus aureus。MRSA)导致健康个体感染的案例日益增多,已经引起全世界的广泛关注。 MRSA菌株对绝大部分B.内酰胺类抗生素都具有抗性,这是由于它额外获得一 个青霉素结合蛋白(penicillin-binding protein,PBP)PBP2a,后者对B.内酰胺类 抗生素的亲和力比PBP2低很多。除PBP2a的表达负责更高水平B.内酰胺类抗 生素抗性之外,许多内源基因己被鉴定为对苯唑西林抗性充分表达所必需。这些 基因中的大部分被称为fern(甲氧西林抗性必需因子,f.ac雠essentialformethicillin resistance)或a/,oc(附属,auxiliary)基因,它们在肽聚糖代谢/结构上发挥直接 或间接作用。 研究指出spoVG基因参与金黄色葡萄球菌苯唑西林抗性,然而调控机制并 不清楚。在本研究中,我们发现SpoVG在MRSA菌株N315中可促进细胞壁合 成并抑制细胞壁降解,从而在苯唑西林抗性中发挥正调控功能。在菌株N315中 敲除spoVG后导致细菌苯唑西林抗性和头孢唑肟抗性都发生显著性降低。而自 溶通常与盘尼西林和p.内酰胺类抗生素杀伤机制有关。我们同时也发现spoVG 敲除株具有更高的Triton X.100诱导自溶速率。 许多涉及细胞壁合成或细胞壁降解的基因会影响细菌甲氧西林抗性或自溶。 为了探究在spoVG敲除株中这些基因的表达水平是否发生改变,我们利用实时 荧光定量PCR检测17个潜在靶基因的转录水平,包括8个涉及细胞壁合成或苯 唑西林抗性的基因t觚彳、mecA、blaZ、p幼J,、p助2、pbp3、pbp4和waS)和9 个细胞壁降解相关的基因(atl、lytN,lrgA、arlS、slel、tytS、cidA、lytM和sara)。 结果表明spoVG敲除株中共有8个相关靶基因转录水平发生改变:fema、mecA 和blaZ的转录水平下降;tytN(编码胞壁质水解酶)的mRNA水平显著性提高, 而lrgA(编码抗穿孔素)、slel(编码胞壁质水解酶)和调控基因(1yts和ads) 的转录水平显著性下降。凝胶阻滞迁移电泳实验表明SpoVG蛋白可以直接结舍 到lytN,femA和lytSR(二元信号系统)的潜在启动子区域上。另外,我们也发 现lytN、#ma和lytSR的潜在启动子区域上至少存在2个5-TAATTxtA-3’序列, 我们的实验结果揭示了mecA基因完整存在情况下,SpoVG通过调控细胞壁 代谢进而影响细菌苯唑西林抗性的分子机制。虽然mecRl.mecI调控mecA的分 子机制已经被广泛研究,但是由附属因子导致抗生素抗性的精确机制仍需深入研 究。我们的研究表明SpoVG是一种新的附属因子,同时进一步阐明了fem/aux基 因的调控通路。 万方数据 摘要关键词:甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌 摘要 关键词:甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌SpoVG细胞壁代谢苯唑西林抗性 Ⅱ 万方数据 AbstractABSTRACT Abstract ABSTRACT Increasing cases of infections caused by methicillin·resistant Staphylococcus aureus(MRSA)strains in healthy individuals have raised concell强worldwide.MRSA strains are resistant to almost the entire family of lB-lactam antibiotics due to the acquisition of all extra penicillin-binding protein PBP2a,which exhibits a remarkably lower affinity for 13-1attains than PBP2.Besides the expression of PBP2a,which is responsible for higher level of p-lactam resistance,several additional native genes have been identified as being essential to the full expression of oxacillin resistance.Most of these genes,called fem(factor essential for methicillin re

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