一穴肛畸形腹腔镜治疗疗效评价及全外显子测序筛选一穴肛畸形致条病基因研究-儿科学专业毕业论文.docx

万方数据 万方数据 北京协和医学院中国医学科学院 博士学位论文 L仪I DNAH2 Magnetic Resonance Imaging D沪lein axonemal heavy chain 2 磁共振成像 动力蛋白基因丝重链 2 SHH Sonic hedgehog 音猾因子 CT Computed tomography 电子计算机 X 射线断层扫描 技术 TULP4 Tubby-like protein 4 类塔比蛋白 4 PCM Pericloaca mesenchyme 泄殖腔周间质 2 北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院中国医学科学院 博士学位论文 中文摘要 第一部分：腹腔镜辅助治疗高位一穴肛畸形及系统性疗效评价 研究背景 一穴肛畸形是先天性肛门直肠畸形中最严重的一种特殊类型，表现为直肠、尿 道及阴道发育不良，汇合成一共同管开口于会阴。一穴肛畸形的手术治疗一直以来 都是4,JL普通外科、泌尿外科领域研究热点，治疗不仅要恢复肛门、尿道及阴道正 常解剖结构，还要恢复其相应功能，手术复杂、术后并发症常见，预后不良。目前 腹腔镜辅助技术己广泛运用于肛门闭锁合并尿道瘘、膀胱瘘的治疗，但腹腔镜辅助 治疗一穴肛畸形仍无详细的报道及系统性疗效评价。 研究目的 本研究通过系统地评价腹腔镜辅助肛门成形术及尿道、阴道成形术的术中情况 及预后，探讨腹腔镜技术在一穴肛畸形治疗中的可行性及有效性。 研究方法 本研究回顾了2005．1 1-2015．2期间手术治疗的高位一穴肛畸形患儿26例，阴道 缺如，需行肠管代阴道手术者，未纳入本研究。腹腔镜辅助肛门成形术及尿道成形 一阴道成形术(LAARP组)17例，其中，2005．11-2014．6，12例患者采用传统三切 口腹腔镜手术：2014．6．2015．2，5例患者采用经脐单切口手术；经腹会阴联合肛门 成形术及尿道成形一阴道成形手术组(APPT组)9例。通过对比LAARP组与APPT 组患儿的手术年龄、骶骨比例(SR值)、共同管长度、手术持续时间、术中出血 量、术后住院时间、术后并发症、术后排便功能等指标系统地评价两组的疗效。 结果 26名高位一穴肛畸形患儿均手术成功，LAARP组无患儿中转开腹，术后一直 接受随访，失访率为0％，随访时间1．11年，平均(4．7 4-2．8)年。两组患儿手术 年龄、共同管长度、合并脊柱骶骨畸形情况、骶骨比例(SR)无明显差异。LAARP 组手术时f司(124．1 4-4．9)min短于APPT组(131．8 4-3．2)min(P0．01)，LAARP组手 万方数据 万方数据 北京协和医学院中国医学科学院 北京协和医学院中国医学科学院 博士学位论文 术出血量(10．5士2．2)ml较APPT组06．2 4-2．7)ml少(P0．01)，术后住院时间LAARP 组明显短于APPT组(P0．01)。术后LAARP组有2例患儿存在直肠粘膜脱垂， APPT组1例，无统计学差异，而APPT组有1例患儿存在切口感染，两组均无尿 道阴道瘘复发、肛门狭窄、尿道狭窄等并发症。排便功能对比以Krickenbeck标准 评价，赋值后LAARP组总评分明显优于APPT组(p=o．047)，但单独比较两组自主 排便运动、便秘、污便三个方面评分值无明显统计学意义。 结论 腹腔镜辅助手术可运用于一穴肛畸形的治疗并可获得较为满意的疗效，且具有 微创、术野清晰等独特优势。 第二部分 基于全基因组外显子测序技术的“一穴肛刀畸 形致病基因筛选 研究背景 一穴肛畸形(Persistent Cloaca，PC)，即先天性肛门直肠畸形合并泄殖腔畸形， 是最严重的一种先天性肛门直肠畸形，有49．4％左右的患儿合并泌尿生殖、心血管、 消化及中枢神经等其他系统的发育异常，部分表现为严重多系统综合症。一穴肛畸 形的发病机制及病因尚不明确，基因突变可能是导致其发病的重要致病因素，但缺 乏系统的、客观的基础研究结果去解释。全基因组外显子测序(Whole．exome sequencing，WES)是指利用序列捕获技术将探针覆盖到的全基因组外显子区域DNA 捕捉并富集后再进行高通量测序的基因组分析方法，主要用于识别和研究与疾病、 种群进化相关的编码区域内的变异。结合大量的公共数据库提供的外显子数据，有 利于更好地解释所得变异结果之间的关联和致病机理，特别适合于复杂先天性疾病 的遗传致病因素筛选。 研究目的 本研究以中国汉族人群一穴肛畸形患者为研究对象，拟在全基因组外显子水平 寻找与一穴肛畸形发病相关的基因突变。 研究方法 选取4例核心家系trio(编号分别为PC01／PC02／PC03／PC04)及8例独立 北京协和医学院中国医学科学院