一般毒性说作用2.pptVIP

一、概述 重复多次接触化学物的毒性研究。  根据持续时间分类（按OECD）： 短期毒性作用（亚急性） （染毒期一般为28天）  亚慢性毒性作用 （啮齿类动物一般为90天，犬为1年） 慢性毒性作用 （啮齿类动物一般为1年，或终身染毒） 第四节 短期、亚慢性和慢性毒性作用 短期、亚慢性和慢性毒性试验的主要目的：  1.观察长期接触受试物的毒效应谱、毒作用特征与毒作用靶器官以及中毒表现（包括症状与体征）等； 2.探索受试物的作用机制； 3.观察长期接触受试物所致毒作用的可逆性； 4.评价毒作用的剂量-反应（效应）关系，确定最大无作用剂量（NOAEL）、阈剂量（LOAEL），为制订人类基础的安全限值提供依据； 5.观察不同动物种属的毒性差异，为试验结果外推到人，确定安全系数提供依据。 二、研究方法（一）短期重复毒性和亚慢性毒性试验基本要求： 1.实验动物的选择  （1）物种与品系 ①啮齿类动物（首选大鼠，品系Wister与SD大鼠） ②非啮齿类动物（犬，品系Beagle） （2）性别、年龄和动物数 雌雄各半；大鼠年龄一般≯6周，体重50-100克，每组动物≮20只。犬用4-6月龄(≯9个月)，每组动物≮8只。 （3）动物等级与饲养条件  清洁级及以上等级动物，屏障环境饲养，饲料、饮水、垫料、气温、气湿、压力、光照等符合GLP要求。 2.染毒途径与染毒期限 应尽量与人实际接触相似的途径；染毒频率一般为每日1次，连续给予（每周可给予5-6次）  （1）经口染毒 ①灌胃法-大小鼠 ②喂饲法-大小鼠（受试物在饲料一般≯5%） ③吞咽胶囊法-犬  （2）呼吸道染毒 每天染毒时间2-6小时（OECD：为持续4小时染毒） （3）注射途径 应注意无菌操作 染毒期限：短期重复暴露-28天；亚慢性暴露-90天 3.剂量选择与分组 一般选择至少3个剂量组和1个阴性对照组（溶剂），若要中期观察或实验结束后恢复期观察，对照组与高剂量组需设计“卫星组”。  剂量组设计原则： ①高剂量组动物应有明显中毒反应，但不引起死亡； ②中剂量组动物出现轻度的中毒反应； (相当于LOAEL水平) ③低剂量组动物无毒性反应； （相当于NOAEL水平） ④剂量组间距一般为2-4倍。 剂量组设计应注意的问题： ①以急性毒性试验中同一动物品系和同一染毒途径获得的LD50为依据； 如28天经口毒性试验可按LD50的10-25%作为最高剂量，最低剂量应是人体预期实际摄入量3倍以上。 ②对于求不出LD50的受试物，即毒性很低的受试物，如药品、食品，可根据人体实际摄入量为依据。 药品：大鼠可用人临床拟用剂量的10、30、100倍，非啮齿类动物可用5、15、50倍的剂量进行剂量设置； 食品：试验剂量应涵盖人体预期摄入量的100倍，在不影响营养摄食与营养平衡情况下，高剂量组可按最大给予量设计。 4.观察指标选择 应能观察到受试物的靶器官和敏感毒性指标。 ① 一般观察指标（中毒症状）； ② 体重、食物消耗量与饮水消耗量； ③ 眼部观察； ④ 血液学指标； ⑤ 血液生化指标； ⑥ 尿常规指标； ⑦ 体温与心电图检查； ⑧ 病理学检查（大体解剖与组织病理学检查）； ⑨ 特异性指标（效应标志物）。 5.观察时间 如果设计恢复期观察： 28天亚急性毒性试验：卫星观察期14天； 90天亚慢性毒性试验：卫星观察期28天；  观察目的：  ① 毒性可逆性； ② 毒性持续性； ③ 毒性迟发效应等； 观察要求： 至少每天观察一次，详细记录中毒症状、体征、毒 效应性质、毒性持续时间、死亡等情况。 （二）慢性毒性试验试验目的：  评价受试动物大部分生命期间给予受试物所发生慢性毒性效应，阐明其剂量-反应关系和靶器官，确定慢性毒性的NOAEL和LOAEL。  根据“3R”原则，慢性毒性试验与致癌试验合并。 1.实验动物与染毒途径选择（与亚急性与亚慢性相同） 2.染毒剂量与染毒期限  一般选择至少3个剂量组和1个阴性对照组（溶剂），