液相增加柱效、提高灵敏可度的小诀窍.pptVIP

液相增加柱效、提高灵敏度的小诀窍 资料收集：cbjcn1985@163.com * * 生化 –多肽- 5988-6316EN 升温对于反相 HPLC分离强疏水肽的影响 (B27) Polypeptide 流动相: A: 含0.05%三氟乙酸的水 B: 含0.05%三氟乙酸的乙腈 2% B / min 进样量: 100μL (50μg的6M脲/5%乙酸) UV: 210 nm 流速: 1 mL/min 室温 液相色谱柱: ZORBAX StableBond-C18 色谱柱尺寸: 4.6 x 250 mm 5μm 室温 300C 400C 500C 600C 700C 提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度） 环保 样品: 除草剂 流动相: 52/48 0.1 M乙酸钠/甲醇, pH 6 流速: 0.45 mL/min 温度: 40℃, 90℃ 检测: UV 除草剂: 柱温的影响 Herbicides: Effect of Column Temperature 1. 西玛津 2. 敌草隆 3. 扑灭津 4. 扑灭净 5. 异丙甲草胺 1. Simazine 2. Diuron 3. Propazine 4. Prometryn 5. etolachlor 液相色谱柱: Zorbax StableBond-C18 色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm, 5μm 40℃ 90℃ 提高柱温，可增加柱效（提高灵敏度） 生物制药 液相色谱柱: Zorbax 300 StableBond-C3 色谱柱尺寸: 4.6 x 150 mm, 5μm 肽类/蛋白质: 升温对分离的影响 Peptides/Proteins: Effect of Elevated Temperature 样品: 多肽 流动相: A = 5: 95, 乙腈 : 水, 0.10%三氟乙酸 (V/V%) B = 95: 5, 乙腈 : 水, 0.085%三氟乙酸 (V/V%) 梯度: 在 20 min内 15-53%, 后运行时间 12 min 流速: l.0 mL/min 温度: 室温 -60℃ 检测: UV 215 nm 1. 亮氨酸脑啡呔 2. 血管紧张素II 3. 核糖核酸酶A 4. 牛胰岛素 5. 细胞色素C 6. 溶菌酶 7. 肌红蛋白 8. 碳酸酐酶 1.Leucine Enkephalin 2. Angiotensin II 3. Rnase A 4. Insulin(BOV) 5. Cytochrome C 6. Lysozyme 7. Myoglobin 8. Carbonic anhydrase 提高柱温， 可增加柱效 （提高灵敏度） 生物制药 液相色谱柱: Zorbax StableBond-C8 色谱柱尺寸: 150 mm, 5μm 减小毛细管内径来提高 低浓度样品的检测灵敏度 Reducing Capillary ID to Improve Sensitivity for Concentration-Limited Samples 流动相: 60%乙腈/40%水 流速: 内径 0.3 mm-4 uL/min 内径 0.5 mm-10 uL/min 内径 1.0 mm-50 uL/min 内径 4.6 mm-1.0 uL/min 温度: 室温 检测器: UV 254 nm 样品: 200 ng联二苯 (100 nl) 减小柱径，可增加柱效（提高灵敏度） 色谱柱技术 – 5988-6454EN 使用小体积色谱柱对于检测器响应时间的重要性 (TE32) 液相色谱柱: ZORBAX StableBond-C18 色谱柱尺寸: 4.6 x 15 mm 3.5μm 流动相: 乙腈: 1%甲酸=32: 68 UV: 254 nm 流速: 1.0 mL / min. 30°C 进样量: 5 μL 响应时间: 4.0秒 响应时间: 2.0秒 响应时间: 1.0秒 响应时间: 0.5秒 响应时间: 0.1秒 1.尿嘧啶 2.乙酰水杨酸 3.N-乙酰苯胺 1.Uracil 2.Acetylsalicylic acid 3.Acetanilide 缩短检测器响应时间，可增加柱效 （提高灵敏度） 色谱柱技术 ：不同硅胶类型比较 (TE1) 流动相: 含0.05%甲醇的二氯甲烷 液相色谱柱 toluene benzanilide phenol benzy