基于量子点和生物传感元件检测真菌毒素的研究-生药学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 研究生优秀毕业论文 学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊 学位论文版权使用授权书 江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版) 电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩 印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许 论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论 文全文数据库》并向社会提供查询，授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本 论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。论文的公布 (包括刊登)授权江苏大学研究生院办理。 本学位论文属于不保奄／。 学位论文作者签名：梯诧锋 指导教师签名： 少J岁年占月l箩日 矽{X每 万方数据 江苏大学硕士学位论文摘 江苏大学硕士学位论文 摘 要 莲子为睡莲科水生草本植物莲Nelumbo nucife阳Gaertn．的干燥成熟种子，是我 国常用的大宗中药材，由于其极高的药用和滋补价值，在食用和医疗保健中发挥了 十分重要的作用，也是我国中药材出口创汇的重要品种之一。该品多产于我国湖北、 湖南、福建等南方温湿地区，富含油脂和淀粉，储藏不当，则易发生霉变。前期研 究，发现莲子在采收、储藏和流通过程中易受真菌毒素污染，严重影响了莲子药材 的质量、安全性和出口创汇。针对莲子真菌毒素污染研究，尤其以黄曲霉毒素和赭 曲霉毒素研究最多，其中黄曲霉毒素，阳性率达70％，其中30％的样品中AFBl含 量超出了限量标准(5 gg／kg)，25％的样品AFs总量超出了限量标准(10 gg／kg)， 国外亦有莲子中黄曲霉毒素污染的报道，为莲子的“药用”和“食用”带来严重的安全 隐患。鉴于莲子药材中黄曲霉素和赭曲霉毒素的污染情况，很有必要建立灵敏准确 的快速筛查分析方法，随行监控采收、储藏和流通过程中药材真菌毒素的污染状况， 保障药材质量。基于此本论文主要研究内容和结论如下： (1)CdSe／CdS核壳量子点的合成。研究采用液体石蜡作为反应溶剂， Cd(DDTC)2为前驱体，以连续壳层前驱体注入方式合成CdSe／CdS核壳型量子点， 并采用透射电镜对其形貌特征进行表征。实验优化了油胺和壳层前驱体在整个反 应体系中的用量，结果表明，在’50％(体积比)油胺和10次前驱体加入量的条件 下，成功制备了点状CdSe／CdS核壳量子点。 (2)基于适配子标记量子点检测OTA。本章首先将油溶性CdSe／CdS量子点 转化为可用于生物标记的水溶性量子点。其次，通过硫代碱基修饰的ssDNA作为 量子点配体，其功能区含有我们需要标记的适配子，“锚”区作为连接量子点的标记 区。通过改变“锚”区硫代碱基的数目，达到控制标记在量子点表面ssDNA数目。 最后，我们用优化的ssDNA．CdSe／CdS作为生物传感器，建立OTA的检测方法， 结果显示，OTA在1．30ng／mL范围内线性关系良好(尺2O．9513)，其线性拟合方 程为y=4．75x+323．18，满足限量标准5 ng／mL的检测要求。 (3)建立间接竞争酶联免疫吸附法快速筛检莲子中黄曲霉毒素B1的污染水 平。本法采用间接竞争酶联免疫法测定了经甲醇．水(80：20)溶液提取后莲子药材 中的黄曲霉毒素B·。通过对包被抗原和一抗工作浓度进行优化，建立了最佳ic— ELISA法，结果显示，AFBl在0．171～7．25 ng／mL之间线性关系良好，R20．978， 万方数据 基于量子点和生物传感元件检测真菌毒素的研究IC50 基于量子点和生物传感元件检测真菌毒素的研究 IC50为1．29 ng／mL，回收率在74．73％～126．9％之间，该法检测限为0．128 ng／mL。 应用该法检测20批莲子药材，结果显示：1～15号样品(30℃、30％湿度条件下贮 藏一年)中AFBl污染水平为1．19～115．3 gg／kg，40％样品中AFBl含量超过限量标 准， 16～20号样品(新购买)中AFBl污染率为40％。对上述结果采用液质联用确 证，样品中AFBl与标品具有相同的保留时间、离子碎片、离子碎片丰度比，排除 了假阳性的检测结果。表明本研究建立的ic—ELISA分析方法操作简便、灵敏、结 果准确，可用于莲子中AFBI的高通量现场快速检测。 关键词：真菌毒素，黄曲霉毒素B1，赭曲霉毒素A，量子点，适配子，酶联免疫 吸附法，莲子 II 万方数据 江苏大学硕士学位论文 江苏大学硕士学位论文 ABSTRACT Nelumbinis Semen(10tus seed)derives from the dried seed of Nelumbo nucifera Gaertn．，whic