髋臼发育不良软骨退行性变可逆性的实验研究-小儿外科学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 复旦大学博士学位论文骨部和坐骨部三部分。髂骨部用于 复旦大学博士学位论文 骨部和坐骨部三部分。髂骨部用于HE染色和电镜检测，耻骨部和坐骨部用 于PCR和Western-blot检测。根据各实验技术要求，标本采用不同的固定 和保存方法。常规HE染色后光镜下测量软骨厚度，观察软骨纤维化。 4．扫描电镜观察软骨表面胶原纤维形态；透射电镜观察软骨细胞的坏死情况 及胞内超微结构的变化。 二I型、II型胶原和整合素B1在髋臼发育不良兔模型髋臼软骨中的表达 1．髋臼软骨标本采集见第一部分。 2．实时荧光定量PCR检测I型胶原、II型胶原、整合素[31 mRNA的定量表达。 3．免疫组织化学SP法检测I型胶原及整合素p1蛋A的定性表达。 4．Western-blot检测I型胶原及整合素p1蛋白的定量表达。 【结果】 一不同时段髋臼发育不良兔模型的建立、影像学和组织形态学观察 1．实验兔死亡共9只，追加样本6只，成活率75％。最后样本量为27，幼兔 每组5只；成兔A组4只、B组3只、C组1只，拆除石膏后实验侧1．5 天内恢复到自然的屈膝屈髋位；余4只拆除石膏后实验侧仍保持在伸膝屈 髋位，构成成兔D组。 2．幼兔中，固定2、4、6周时实验侧AI逐渐上升，与固定前相比有统计学差 异(p0．05)，均明显大于各自的对照侧(pO．01)；AHI逐渐下降，与对照 侧相比有统计学差异(p0．01)。成兔中，A、B两组实验侧AHI、Sharp角 与对照侧差别无统计学意义。C组实验侧AHI较对照侧小，Sharp角比对照 侧大。D组实验侧AHI比对照侧降低(p0．05)；Sharp角比对照侧升高 (p0．01)，较A组实验侧也升高(pO．05)。 3．幼兔中，各组实验侧髋臼软骨外缘比对照侧增厚，差异均有统计学意义，A 组(p=O．019)、B组(p=O．025)、C组(p0．001)。成兔中，各组实验侧和 对照侧厚度无明显差别；实验侧髋臼软骨外缘发生纤维化，A组l例、B 组2例、C组1例、D组4例，后者与对照侧相比有统计学差异(p_0．014)。 4． 扫描电镜观察发现幼兔A组实验侧髋臼软骨表面胶原纤维明显较对照侧粗 大；B、C两组制片不理想。透射电镜结果示A组对照侧软骨分为4层，各 层细胞形态良好，表面纤维致密；实验侧第2、3、4层均可见到大量坏死 髋臼发育不良软骨退行性变可逆性的实验研究 髋臼发育不良软骨退行性变可逆性的实验研究 摘要 软骨细胞；B、C两组坏死软骨细胞数较A组少。成兔中，A组实验侧未见 明显异常：B组实验侧髋臼软骨细胞内脂滴增多，溶酶体小体增多。 二I型、II型胶原和整合素p1在髋臼发育不良兔模型髋臼软骨中的表达 1．I型胶原：免疫组织化学染色结果发现实验侧和对照侧髋臼软骨中均有I型 胶原的表达。实时荧光定量PCR示mRNA表达成兔较幼兔升高，成兔D 组实验侧比对照侧降低(pO．05)。Western-blot示I型胶原蛋白随兔龄增加 表达升高，实验侧的表达较对照侧低。 2．II型胶原：实时荧光定量PCR示实验侧和对照侧间mRNA表达无统计学差 异；幼兔实验侧A组表达即有明显上升，随后B组下降，最后C组又上升； 对照侧中随年龄增加表达不断上升。 3．整合素B1：免疫组织化学染色结果发现实验侧和对照侧髋臼软骨中均有整 合素Bl的表达。实时荧光定量PCR示实验侧和对照侧间mRNA表达无统 计学差异。Western-blot结果示成兔B组实验侧蛋白表达较对照侧升高。 【结论】 一不同时段髋臼发育不良动物模型的影像学、组织形态学以及超微结构的改 变在一定的时间节点上具有可逆性，可能为小儿髋臼发育不良治疗时点的 选择提供理论依据。 二髋臼发育不良中幼兔髋臼软骨外缘厚度增加、成兔发生纤维化以及软骨细 胞超微结构改变，可能是髋臼发育不良向骨关节炎演变的病理基础。 三髋臼发育不良兔模型髋臼软骨中I型、II型胶原表达的结果提示：这两个胶原 参与了关节软骨的纤维化过程。 【关键词】 髋臼发育不良；髋臼软骨；退行性变；骨关节炎：动物模型；新西兰大白兔； X线骨盆片；髋臼指数：臼头指数；Sharp角；软骨厚度：纤维化；超微结构； I型胶原；II型胶原；整合素131；HE染色；扫描电镜；透射电镜：免疫组织化 学染色；实时荧光定量PCR；Western．blot 复旦大学博士学位论文Experimental 复旦大学博士学位论文 Experimental Research of the Reversibility of Cartilage Degeneration in the Acetabular Dysplasia Abstract 【Background】 Acetabular dysplasia(AD)，which may