中药制剂作的含量测定.pptVIP

紫外－可见分光光度法 （一）基本原理：A = E c l 仪器：紫外-可见分光光度计 光源 单色器 比色皿 检 测 器 （二）用途：总成分的测定 （三）定量方法： ① 吸收系数法 ② 标准曲线法 ③ 对照品比较法 紫外－可见分光光度法 取本品粉末…，精密称定，…加盐酸-甲醇（1:100）… ，回流……置氧化铝柱……用乙醇洗脱，收集洗脱液，……。 　……在345nm的波长测定吸光度，按盐酸小檗碱（C20H18Cl16NO4）的吸收系数（ ）为728计算 ※ 注意：对仪器进行波长校正 计算公式： 吸收系数法 吸收系数法 A= 0.358 w = 0.9926g H2O% = 8.0% 标准曲线法 1 2 3 4 5 c A 回归求方程 A = k c + m 注意： 供试品浓度应在线性范围内 cx Ax 相关系数r 0.999 排石颗粒中总黄酮的含量测定 对照品溶液的制备 每1ml含无水芦丁0.2mg 测定 取本品…照标准曲线…依法测定 标准曲线的制备 精量对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml，分别置10ml量瓶中，…加5%亚硝酸钠…硝酸铝…氢氧化钠…再加50%甲醇至刻度，摇匀。在510nm下测定A，以A为纵坐标，c为横坐标，绘制标准曲线 标准曲线法 1、某同学欲用吸收系数法测定三黄片中总生物碱，请设计一个合理的供试品溶液制备的实验方案 2、某同学欲用分光光度法测定冠心丹参片中总皂苷，为除去杂质干扰，请设计一个有效的供试品溶液制备的方法 （一）基本原理 A = k w 仪器：薄层扫描仪 薄层扫描法（TLCS） （二）实验条件 λ 例：熊果酸 薄层扫描法 吸收扫描法 光源：氘灯、 钨灯 扫描方式：锯齿式 测光方式：透射、反射 设定散射系数SX 双波长扫描法 λR λS A 例：小檗碱 特点：灵敏度高 荧光扫描法 薄层扫描法 光源：汞灯 直线式扫描 无需曲线校直 （三）定量方法 A w w1 wx w2 A1 A2 Ax ? 点样量在线性范围内 ? 交叉点样：每一样品≥2个点样点 ? 市售预制板 外标二点法 例：P80 薄层扫描法 气相色谱法（GC） 载气 色谱柱 进样 检测器 （一）基本原理 （二）实验条件 ◆ 固定相：硅氧烷类固定液 ◆ 色谱柱：弹性交联石英毛细管柱 ◆ 检测器：FID ◆ 进样量：1~2μl，分流进样，分流比 ※ 特点：适用于挥发性及易气化的成分 不同成分灵敏度不同 进样量重复性差 气相色谱法 （三）定量方法：内标法 选择某纯物质作为内标物，准确称量，加入待测液中，比较待测组分与内标物的峰面积 相对校正因子： S x 气相色谱法 例1 马应龙麝香痔疮膏中龙脑含量测定（P84） 【校正因子测定】 内标：水杨酸甲酯3.0mg/ml 对照品：龙脑2.0mg/ml 吸取1μl，注入气相色谱仪，计算校正因子 【测定法】取本品约1g，……，精密加入 内标溶 液10ml，超声……滤过，吸取续 滤液1μl，注入气相色谱仪…。 气相色谱法 iS R 【对照品溶液】 iS：3.0mg/ml As = 882 R：2.0mg/ml AR =600 气相色谱法 iS x 特点：定量准确度与进样量无关 【供试品溶液】 m：1.050g iS：3.0mg/ml As = 980 Ax =700 气相色谱法 系统适用性试验P81 ◆ 理论塔板数：n ◆ 分离度：R≥1.5 ◆ 拖尾因子：0.95≤T≤1.05 ◆ 重复性：n≥5，RSD≤2.0% 气相色谱法 （一）实验条件 色谱柱：ODS（5μm，4.6mm×250mm） 流动相：色谱纯，脱气，水相过0.45μm膜 检测器：UVD，ELSD 高效液相色谱法（HPLC） （二）方法分类 1、反相键合相色谱 固定相：C18、C8 流动相：甲醇-水、乙腈-水 洗脱顺序：极性大→小 对象：低极性成分 例：药典P126 辛夷 木兰脂素 固定相：C8 流动相：乙腈-四氢呋喃-水 高效液相色谱法 离子抑制色谱法 3.0 ≤ pKa≤7.0：醋酸、磷酸、磷酸盐 6.0 ≤ pKb ≤ 7.0：氨水、乙二胺、磷酸盐 例1：P90 反相键合相色谱 离子对色谱