马铃薯-茄子体细胞杂种遗传组分分析及青枯病抗性评价-蔬菜学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 研究生优秀毕业论文 马铃薯．茄子体细胞杂种遗传组分分析及青枯病抗性评价目 马铃薯．茄子体细胞杂种遗传组分分析及青枯病抗性评价 目 录 摘 要 i Abstract ． ．．iii 缩略语表 Vi 1前言 一1 1．1课题提出 ～l 1．2前人研究进展 ．．3 1．2．1植物体细胞杂种创新种质资源的应用概况 3 1．2．2体细胞杂种的遗传组分研究 7 1．2．3植物青枯病抗性遗传分析 。12 1．3本研究目的与内容 21 2材料与方法 22 2．1实验材料 ．22 2．1．1马铃薯融合亲本 22 2．1．2茄子融合亲本 ．22 2．1．3非对称融合再生株系 22 2．1．4对称融合再生株系 22 2．2实验方法 一23 2．2．1试管苗的培养与繁殖 ．．23 2．2．2田间种植 ．23 2．2．3农艺性状观测与统计 一23 2．2．4植物基因组DNA提取 23 2。2．5 SSR分子标记组分鉴定 24 2．2．6青枯病抗性鉴定 ： ．25 2．2．7性状与标记的相关性分析 ．．26 2．2．8插入片段的侧翼序列生物信息学分析 ～26 3结果与分析 27 3．1体细胞融合亲本特异标记筛选 一27 3．1．1 DNA质量检测 ．27 3．1．2融合亲本特异标记的筛选 一27 3．2马铃薯．茄子(StS／SmS08．1(20’))非对称融合杂种分析 36 3．2．1体细胞杂种的遗传组分 36 3．2．2体细胞杂种的植株性状观察 43 3．2．3体细胞杂种的遗传组分、倍性异常与田间表型的相关性分析 54 3．2．4体细胞杂种的青枯病抗性及与遗传组分的相关性分析 55 3．2．5抗性相关序列的生物信息学分析 57 万方数据 华中农业大学2015 华中农业大学2015届博士研究生学位论文 3．3马铃薯．茄子对称融合杂种分析 59 3．3．1再生植株的杂种鉴定(Stl42／Sm508．3) ．59 3．3．2体细胞杂种遗传组分分析 一59 4讨论 64 4．1体细胞杂种的遗传组分 ．64 4．2体细胞杂种植物学性状与倍性异常、分子标记的相关性 一65 4．3体细胞杂种的青枯病抗性以及抗性相关标记研究 66 4．4对称原生质体融合与非对称原生质体融合的比较分析 一67 4．5育种潜质的选择 ．68 4．6研究展望 69 参考文献 70 附勇乏1 一 ．85 附j畏2 89 附jj毛3 ．101 附录4 ．103 jli【 谓} 107 U 万方数据 马铃薯．茄子体细胞杂种遗传组分分析及青枯病抗性评价摘要 马铃薯．茄子体细胞杂种遗传组分分析及青枯病抗性评价 摘要 原生质体融合技术是远缘物种间优良性状转移的重要技术之一，在改良栽培 种抗性、细胞质替换等应用中具有独特的优势。在马铃薯中这一技术的应用能转 移马铃薯野生种和近缘种的有利性状，创制新种质，改善目前栽培马铃薯遗传资 源狭窄的状况。本研究以前期实验室创制的马铃薯和茄子非对称原生质体融合的 50个再生株系(St8／Sm508．1(20-))和对称融合的103个再生株系(Stl42／Sm508．3) 为研究材料，通过双亲特异的SSR标记确定杂种及其遗传组分，并对非对称融 合体细胞杂种的青枯病抗性及农艺性状进行评价，为其利用提供理论和材料基 础。主要研究结果如下： 1．融合亲本的特异SSR标记筛选。研究用已报道的有染色体定位信息的SSR 引物369对(其中马铃薯133对，茄子236对)，对包含融合亲本在内的9个马 铃薯和7个茄子基因型进行特异标记筛选。369对引物中，144对引物在马铃薯 中有特异带，214对引物在茄子中有特异带。在具有马铃薯特异带的引物中，48 对引物有马铃薯染色体的定位信息，其余96对引物为茄子SSR引物在本研究马 铃薯基因型中有特异带；204对茄子SSR引物在茄子亲本中有染色体定位信息。 在茄子具有特异带的引物中，有96对引物在马铃薯和茄子中同时具有特异带。 2．非对称体细胞杂种鉴定与分析。首先利用茄子亲本特异的SSR引物对非 对称融合再生株系进行鉴定，结果显示，50个融合子有42个携带茄子特异SSR 标记，表明其为体细胞杂种。其中40个杂种进行了倍性鉴定，显示四倍体杂种 有32个，其余8个杂种除1个为八倍体外，其它7个均为混倍体或非整倍体。 32个茄子特异SSR引物在杂种中检测到44个位点，平均每个体细胞杂种插入 2．9个位点。这些插入的茄子片段分布在茄子的12条染色体上，其中4号染色体 的特异位点多达10个，其它染色体为1—4个不等。 3．非对称体细胞杂种的农艺性状和植物学性状观察。研究采用试管苗网室钵 载观察了体细胞杂种部分植物性性状。观察显示，四倍体杂种生长基本正常，但 倍性异常的杂种生长受到明显阻滞，如混倍体St8／Sm508．1(2