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第12说章3节肽链的生物合成过程
大理学院基础医学院 林春榕 蛋白质生物合成 (protein biosynthesis) 以氨基酸为原料; 以mRNA为模板; 以tRNA为运载工具; 以核糖体为合成场所; 起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与合成蛋白质的过程。 翻译时,从mRNA的起始密码子AUG开始,按5ˊ→3ˊ方向逐一读码,直至终止密码子。于是,合成中的肽链从起始甲硫氨酸开始,从N-端→C-端延长,直至终止密码子前一位密码子所编码的氨基酸。 原核生物的肽链合成过程 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination ) 原核生物mRNA在核蛋白体小亚基上的准确定位和结合涉及两种机制: S-D序列,又称核糖体结合位点(ribosomal binding site, RBS); mRNA序列上紧接S-D序列后的小核苷酸序列,可被核蛋白体小亚基蛋白rpS-1识别并结合。 通过RNA-RNA、RNA-蛋白质相互作用,mRNA序列上的起始AUG即可在核糖体小亚基上准确定位而形成复合体。 S-D序列 在各种mRNA起始AUG上游约8~13核苷酸部位,存在一段由4~9个核苷酸组成的一致序列,富含嘌呤碱基,如-AGGAGG-,称为Shine-Dalgarno序列(S-D序列),又称核蛋白体结合位点(ribosomal binding site, RBS)。一条多顺反子mRNA序列上的每个基因编码序列均拥有各自的S-D序列和起始AUG。 翻译起始复合物的组分 70S完整核糖体 mRNA fMet-tRNAfMet 起始因子的功能 IF1----占据A位,防止结合其他的氨基酰tRNA; IF2----促进起始fMet-tRNAfMet与小亚基的结合; IF3----促进大、小亚基分离,提高P位对结合fMet-tRNAfMet的敏感性。 指在mRNA模板的指导下,氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。 EF-G有转位酶(translocase)活性,可结合并水解1分子GTP,释放的能量促进核蛋白体向mRNA的3′侧移动,使起始二肽酰-tRNA-mRNA相对位移进入核蛋白体P位,而卸载的tRNA则移入E位。 延长因子的功能 EF-Tu----促进氨基酰-tRNA进入A位,结合并分解GTP; EF-Ts----调节亚基; EF-G----有转位酶活性,促进mRNA-肽酰-tRNA由A位移至P位,促进tRNA卸载与释放。 蛋白质生物合成的能耗 蛋白质生物合成是耗能过程,每增加1个肽键平均需要消耗由GTP或ATP提供的5个高能磷酸键。 具体如下: 活化:1个ATP(2个高能磷酸键) 进位:1个GTP 移位:1个GTP 为保持蛋白质生物合成的高度保真性,任何步骤出现不正确连接都需要消耗能量而水解清除。 思 考 题 1、试述原核生物肽链生物合成过程。 2、简述参与原核生物肽链生物合成过程的蛋白质因子及其生物学功能。 3、试述原核生物mRNA在核糖体小亚基上的准确定位的两种机制。 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 成肽→转位→下一轮进位 进位 转位 成肽 肽链合成延长(核蛋白体循环)过程 (三)终止(termination ) 指核蛋白体A位出现mRNA的终止密码子后,多肽链合成停止,肽链从肽酰-tRNA中释出,mRNA、核蛋白体大、小亚基等分离的过程。 终止阶段需要释放因子RF-1、 RF-2和 RF-3参与。 原核肽链合成终止过程 RF-3可结合核蛋白体其他部位,有GTP酶活性,能介导RF-1、RF-2与核蛋白体的相互作用。 释放因子的功能: 识别终止密码子 RF-1特异识别UAA、UAG; RF-2特异识别UAA、UGA。 诱导转肽酶转变为酯酶活性 催化新生肽链与结合在P位的tRNA之间的酯键水解,使肽链从核蛋白体上释放。 多聚核蛋白体的形成可以使蛋白质生物合成以高速度、高效率进行。 (四)多聚核蛋白体(polysome) 1条mRNA模板链都可附着10~100个核蛋白体,这些核蛋白体依次结合起始密码子并沿5′→3′方向读码移动,同时进行肽链合成,这种mRNA与多个核蛋白体形成的聚合物称为多聚核蛋白体(polysome) 。 多聚核蛋白体 电镜下的多聚核蛋白体 * 目录 * 目录 * * * * 肽链的生物合成过程 The Biosynthesis Process of Peptide Chain 本节重要知识点 原核生物肽链合成基本过程; 70S起始复合物的组成; 参与原核生物肽链合成的主要蛋白质因子及其生物学功能。 氨基
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