陈启龙西第三章.pptVIP

Chapter 3 RNA transcription 生命与环境科学学院 陈启龙 2009-05 1. 转录的概念 为何“种瓜得瓜”？ 为何“种豆得豆”? 为何“龙生龙，凤生凤”？ 又为何“老鼠的儿子会打洞”？ 遗传信息！——是如何传递的？ （2）转录起始(initiation) RNA聚合酶与启动子结合 转录泡 RNA链上第一个核苷酸键的产生。 通过启动子阶段：转录起始后直到形成9个核苷酸短链。 通过启动子的时间反映了该启动子的强弱。 （3）转录延伸(elongation) RNA聚合酶释放σ离开启动子，沿DNA链移动并使新生RNA链沿5’-3’不断伸长。 （4）转录终止： 到转录终止位点时，RNA-DNA杂合物分离，转录泡瓦解，DNA恢复双链，RNA链释放。 真核生物RNA聚合酶 细胞核中：有三类,由8~14个亚基组成； 线粒体中：线粒体RNA聚合酶只有一条多肽链，是最小的 RNA聚合酶之一； 叶绿体中：叶绿体RNA聚合酶大，多个亚基 * * DNA RNA 蛋白质 遗传信息的贮存者，它通过自主复制得到永存，并通过转录生成mRNA、翻译生成蛋白质的过程来控制生命现象。 RNA既担负贮藏及转移遗传信息的功能，又能作为核酶直接在细胞内发挥代谢功能。 贮存在任何基因中的生物信息都必须先被转录为RNA，才能得到表达。 基因表达包括的两个阶段： 转录(transcription)和翻译(translation) 转录：以DNA为模板，在RNA聚合酶的作用 下，利用4种三磷酸核苷酸（A,U,G,C） 合成一条与DNA模板链互补的RNA单链 的过程，是基因表达的核心步骤。 编码链（有意义链） （非编码链/无意义链/反义链） 除少数RNA 病毒外,所有RNA分子都来自DNA; RNA主要以单链存在; 生物体内共有3种RNA： 信使RNA (mRNA)—编码蛋白序列 转运RNA (tRNA)—解读mRNA中遗传信息并转 运氨基酸 核糖体RNA (rRNA)—核糖体中蛋白合成 2. RNA转录的基本过程 模板识别 转录起始 转录延伸 转录终止 （1）模板识别(template recognition) RNA聚合酶与启动子相互作用并相结合. 启动子(promoter):基因转录起始的一段必需DNA序列。 RNA聚合酶与启动子的识别： 原核：直接识别。 真核：不能直接识别，需要转录调控因子按特定 顺序结合于启动子上。 ----转录起始前复合物（PIC） 3. 转录机器的主要成分 3.2.1 RNA聚合酶 原核生物RNA聚合酶 只有一种。大肠杆菌RNA聚合酶由2α,β, β’和ω组成核心酶，加σ后成为全酶(4.65×l05)。 大肠杆菌RNA聚合酶的亚基组成 α亚基与核心酶的组装及启动子识别有关，并参与 RNA聚合酶和部分调节因子的相互作用。 β和β’亚基组成聚合酶的催化中心。β亚基能与模 板DNA、新生RNA链及核苷酸底物相结合。 σ因子负责启动子的选择和转录的起始。 —— 提高对启动子的亲和力（ 2*1011 1015）,降低对非特异 性位点的亲和力（2*1011 108），特异性共提高107倍。 RNA聚合酶全酶作用是启动子的选择和转录的 起始（σ因子），核心酶的作用是链的延伸。 下图表示何种含义？ E.coli RNA聚合酶功能 识别DNA双链上的启动子； 使DNA在启动子处解成单链； 通过阅读启动子序列，确定转录方向和模板链； 到达终止子时，识别终止子，停止转录。 RNA聚合酶Ⅰ 细胞核RNA聚合酶 RNA聚合酶Ⅱ 真核细胞 RNA聚合酶Ⅲ RNA聚合酶 线粒体RNA聚合酶 叶绿体RNA聚合酶 其中,RNA聚合酶Ⅱ最重要,转录所有编码功能蛋白的真核基因. 3.2.2 转录复合物 RNA聚合酶全酶 二元封闭复合物(-35) 二元开放复合物(-10) 三元转