大鼠骨髓间充质干细胞培养鉴定与成胰岛样β-中国细胞生物学学报.PDF

中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2016, 38(5): 540–549 DOI: 10.11844/cjcb.2016.05.0041 大鼠骨髓间充质干细胞培养、鉴定与 β 成胰岛样 细胞诱导 王鹤霏 任 宇 呼 啸 张飞旭 李晓聪 仓 明 刘东军* ( 内蒙古大学国家动物转基因技术研究中心, 呼和浩特 010070) 报 β 摘要 为治疗糖尿病寻找新的胰岛 细胞替代物, 该研究对大鼠骨髓间充质干细胞(bone β marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)进行了体外分离培养、鉴定及成胰岛样 细胞诱导。应 用全骨髓离心贴壁培养法分离大鼠BMSCs, 进行培养、传代、表面标志物检测, 利用DMSO和高 β 学 糖环境对BMSCs进行胰岛样 细胞诱导。结果显示, 大鼠BMSCs体外培养细胞形态呈成纤维细胞 样, 可以稳定传代; CD13、CD44和CD106表达呈阳性, CD49d呈阴性。在成胰诱导条件下, BMSCs 可形成胰岛样圆形细胞团, 双硫腙染色呈棕红色, PDX1(pancreatic duodenal homeodomain 1)、 CK19(cytokeratin 19)、巢蛋白、胰岛素免疫组化染色均呈阳性; 经RT-PCR检测发现, 成胰诱导后 学 PDX1 glucagon 的BMSCs 中表达胰岛素、 和 基因; 经q-PCR检测发现, 成胰诱导后的BMSCs 中胰岛 素mRNA水平是大鼠胰腺成体干细胞(pancreas adult stem cells, PASCs)的1.09倍(P0.05); 同时, 有 相应量的胰岛素合成。结果表明, 分离得到大鼠BMSCs体外生长稳定, 能转分化为胰岛样细胞, 该 研究结果为糖尿病治疗提供了新的实验依据。 物 β 关键词 骨髓间充质干细胞; 体外分离培养; 细胞鉴定; 成胰岛 细胞分化 Cultivation, Identification and Islet β Cells Induction of Bone Marrow 生 Mesenchymal Stem Cells in Rats Wang Hefei, Ren Yu, Hu Xiao, Zhang Feixu, Li Xiaocong, Cang Ming, Liu Dongjun * (National Research Center for Animal Transgenic Bio-technology, Inner Mongolia University, Hohhot 010070, China) 胞 Abstract To find new substitution of islet β cells for treating diabetes, rat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs)