基因工程及其应只用上课用.pptVIP

【例1】 如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 (　　)。 A．①②③④ B．①②④③ C．①④②③ D．①④③② 规律总结 几种酶的比较 三、转基因生物、食品的安全性 * * * * * 第二节 基因工程及其应用 1、定义： 一、基因工程 原理？ 水平? 又叫基因拼接技术或DNA重组技术。一种生物的某种基因提出，修饰改造，放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 基因重组 目的？ 对象？ DNA分子水平 基因 定向地改造生物的遗传性状 二基因操作工具 基因的“剪刀” 基因的“针线” 基因的运输工具 ——限制性内切酶 ——DNA连接酶 ——运载体 思考：三种工具是不是全是酶？ 1、基因工程的“ ” 指“ 限制性核酸内切酶 ” 主要在原核生物中 一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割 磷酸二酯键 切点: 分布： 特点: “ ” G A A T T C C T T A A G C T T A A G A A T T C G EcoRI：大肠杆菌的一种限制酶。能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 结果：产生两个粘性末端（碱基互补配对） 剪开脱氧核苷酸间的磷酸二酯键 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 讨论：要想从DNA上切下目的基因，应切几个切口？产生几个黏性末端？ 2个切口 4个黏性末端 ——DNA连接酶 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。 磷酸二酯键 磷酸二酯键 2、基因工程的“ ” ——DNA连接酶 DNA连接酶可把相同黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子就形成了。 磷酸二酯键 磷酸二酯键 2、基因工程的“ ” DNA连接酶连接两个DNA片段上的磷酸二酯键 甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 形成重组DNA分子 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 碱基互补配对形成氢键 3、基因工程的 “运载体 ” 常用的有质粒、噬菌体、动植物病毒等 1.能在宿主细胞中复制并稳定保存 2.具多个限制酶切点----能与目的基因连接 3.对宿主细胞无害 4.具有标记基因—检测目的基因是否导入到受体细胞 作为运载体必须具备哪些条件？ 三基因工程的操作步骤 1提取目的基因 2目的基因与运载体结合 3将目的基因导入受体细胞 4目的基因的检测与鉴定 用同一种限制酶切割：获得相同的粘性末端 DNA连接酶连接形成重组DNA分子 目的基因成功表达：产生相应的蛋白质或表达相应的形状 利用标记基因对受体细胞进行筛选 1、基因工程与作物育种 四基因工程的应用 2、基因工程与药物研制 3、环境保护: 基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。 环境监测：　　基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。 优点：目的性强，育种周期短，克服远缘杂交不亲和的障碍 原理：基因重组 2．下列有关基因工程技术的叙述，正确的是 A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体 B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列 C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞时因为细菌繁殖快 D．只要目的基因进入了受体细胞就能实现成功表达 C C 作用部位 作用底物 解旋酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 限制酶 种类 项目　　 作用结果 　 作用特点 DNA分子 DNA片段 脱氧核苷酸 DNA分子 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 氢键 切割特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 连接双链DNA片段两个核苷酸之间的磷酸二酯键 只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 将DNA 两条链之 间的氢键 打