环境激素邻苯二甲酸二丁酯免疫检测Ⅱ———抗体的制备-应用化学.PDFVIP

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2019-03-30 发布于天津
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环境激素邻苯二甲酸二丁酯免疫检测Ⅱ———抗体的制备-应用化学.PDF

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24 5 Vo.l24 No.5 2007 5 　　　　　　　CHINESEJOURNALOFAPPLIEDCHEMISTRY　　　　　　　 May2007 Ⅱ——— a, b a＊ a 张明翠　庄惠生　郎　庆 a b (　 20 1620; 　) 　　(DBP) BSA, , DBP, 1 ∶32 ～ 1 ∶64, 1 ∶6 400 ～ 1 ∶12 800。、, IgG, -20 ℃。。 , 、、、、、(2- ) 10%。 DBP。　, , , :O625.5　　　　　:A　　　　　:1000-0518 (2007 )05-0530-04 (DbutylPhthalat,eDBP)、、、 [1, 2] 、。, [3 ～6] 。, 、 [7, 8] [9, 10] , 。、、、、、,、、[11, 12]。 DBP DBP。 DBP, , ,。 DBP。 [13] DBP , DBP、。 1　 1.1　 FLX800 (Bo-Teknstrument,sInc.USA);970 CRT ( );pHS-3 C pH( ); ( );TGL- 16 G ( );TU-1800 ( ); ( );96 ( );LRH-250 -A ( )。 4 - (≥ 99%, ); (BSA, MW67000, ); (OVA, MW43000, ); ( );( ); ( ); (1 +2, ); IgG(FITC-IgG, );;0.05 mol/L, pH=9.6(NaCO1.59 g, NaHCO2.39 g, 2 3 3 1 L);0.01 mol/L ( 8 g/LNaCl0.5 mL/LTween); ()。 2006 -08-23, 2006 -11-23 ) :, , , ;E-ma:lhszhuang@dhu.edu.cn;:、　 5 :Ⅱ——— 5 31 ,。。 ,。 1.2　 DBP [13]。 500 μg DBP DBAP-BSA 1 mLPBS(pH=7.4 ), # # , , (31 32 )。 3 , , 、, 2 。 7 ～8 d, 。 , ,。 1 h, 13 000 r/mn 15 mn, , (NH)SO,, DEAE- 4 2 4 32 IgG,,,。 1.3　 1.3.1　琼脂双扩散试验　 DBP。。 1.3.2　间接荧光免疫法　 DBAP-OVA,, ,、, 。 1.5×10-5 g/mL DBAP-OVA (pH=9.6 ) 96 , 100 μL, 4 ℃。, PBST 3, 3 mn,; 1%OVA, 100 μL, 37 ℃ 1 h,, PBST 3, 3 mn,; (1 4∶00, 1 ∶800, 1 ∶1 600, 1 ∶3 200, 1 ∶6 400, 1 ∶12 800, 1 ∶25 600 ), 100