链霉素生产工艺及结构改造..pptVIP

发酵工艺流程图： 链霉素生物合成的途径及代谢调节机制 1 链霉素的生物合成途径 由D-葡萄糖和NH3合成 链霉素的大致途径如右图所示 2 链霉素生物合成的调节机制 在链霉素生物合成中的调节机制主要有发酵阶段的转变、分解产物的调节以及无机磷的反馈抑制等方面。 2.1 发酵阶段的转变 催化链霉胍的2个转脒基反应的酶，在合成阶段开始时的突然出现是由于新的蛋白质的合成，而不是蛋白质的激活。 2.2 分解代谢产物的调节 在发酵过程中，除形成链霉素外，还形成一种支路产物—甘露糖链霉素(又叫链霉素B)。对大多数微生物来说，甘露糖链霉素的生物活性只有链霉素的20%-25%。直到发酵后期才产生水解甘露糖链霉素的α-D-甘露糖苷酶，能迅速把甘露糖链霉素水解成链霉素和甘露糖，反应如下： 甘露糖苷酶 链霉素-甘露糖 链霉素+甘露糖 2.3 无机磷的反馈抑制 正常生长所需的无机磷浓度抑制链霉素的形成。磷酸盐与链霉素的生物合成过程有密切关系，在链霉素生物合成中有几步磷酸酯酶所催化的去磷酸化反应。过量的磷酸盐会产生反馈抑制，阻抑这几步的一个或多个磷酸酯酶的活性或形成，因而抑制链霉素的合成，因此磷酸酯酶的活力与链霉素的形成有密切关系。此外磷酸盐还能调节链霉胍合成的关键酶——脒基转移酶的形成，高浓度磷酸盐严重阻遏该酶的形成。 离子交换法提取和精致链霉素 原理 链霉素是一种有机碱，其盐类在中性及酸性水溶液中可解离成三价阳离子、故可用阳离子交换树脂提取。 链霉素在pH4~7时稳定，所以链霉素的吸附只能在中性条件下进行。氢型羧酸型树脂在酸性条件下电离度都很小，交换容量很低，只有在碱性条件下才能起交换作用，而链霉素在碱性条件下很不稳定。因此应将其转成钠型并选择在中性条件下进行吸附。 链霉素是高价离子，配制较稀的溶液有利于链霉素的吸附而不利于杂质的吸附，从而得到某种程度的提纯。羧酸型树脂对氢离子的亲和力大，用酸洗脱能使链霉素洗脱完全。链霉素离子交换吸附和洗脱可用下列方程式表示: 吸附： 3RCOONa+St+3 ? (RCOO)3Str+3Na 洗脱： (RCOO)3Str+3H+ ? 3RCOOH+Str+3 链霉素经过离子交换树脂处理后，体积缩小十分之一，得以浓缩，而且纯度也有所提高。 然而链霉素发酵液中绝大部分是菌丝体和未用完的培养基，以及各种各样的代谢产物，如：蛋白质、多肽、色素和Ca2＋、Mg2＋离子等等，链霉素浓度远较各种杂质的低，仅为5000单位/毫升左右。大量蛋白、多肽和高价离子(Ca2＋、Mg2＋)的存在对离子交换吸附影响很大。 在离子交换处理前，一般采用蒸汽加热（70～75℃）方法使蛋白质凝固变性。添加磷酸或一些络合剂如三聚磷酸等使高价离子草酸、磷酸生成不溶性沉淀物，然后通过板框过滤或离心分离将这些沉淀物除去。这一预处理将导致10％以上的链霉素所添加的草酸、磷酸或络合剂，既增加了链霉素提炼成本，又会降低产品纯度、污染环境。 同时所得的发酵滤液中仍存在许多蛋白、多肽和其它各种杂质，将会减少树脂的吸附容量或污染树脂，造成树脂的沉降和堵塞，进而缩短树脂的寿命，增加 抗生素提炼的成本。 此外采用离子交换法提炼链霉素，总收率不高，只达72％。同时需大量解吸液。解吸液中链霉素浓度低，各种杂质如色素、金属离子等含量较高，造成下游工艺处理困难 ，产品纯度不高。 新的工艺方法 三达新工艺 膜法工艺取代链霉素生产中的薄膜蒸发工艺，使这一问题得到了很好的解决。膜分离是一种无相变的纯物理手段，能在任何膜能承受的温度下对料液进行分子水平的分离。清洁，环保，占地少，另外它的一大优势是运行成本低，去除一吨水的成本比普通的三效蒸发器低，有效地控制产品，提高了产品的质量。 Flow-Cel超滤技术替代传统的板框压滤/鼓式真空过滤方法。 其最大的特点是在不需要加入助滤剂、絮凝沉淀剂及其他任何化学试剂的情况下，不仅可把菌丝体及其他固体杂质完全分离，而且可以把99％以上的蛋白(包括溶解性的蛋白) 与菌丝体一起剔除。 Flow-Cel超滤技术实质是把传统工艺中剔除蛋白(絮凝沉淀)、菌丝分离（板框压滤/鼓式真空过滤），去除乳化(破乳剂的使用)等多种传统的提炼与纯化工艺用Flow-Cel超滤技术加以替代，既减少了设备的投资，及原辅材料(如助滤剂、絮凝剂、破乳剂等) 的消耗，还大大提高了链霉素预处理的收率，使得传统意义上板框压滤/鼓式真空过滤 工艺中10～15％的链霉素损失下降到1％的水平。 Flow-Cel超滤组件适于处理高粘度的流体并达到较高的浓缩倍数，使含菌 丝/蛋白及