响应面法优化富硒金针菇菌株发酵培养基探究.pdfVIP

食用菌学报@2006．13(1)：33--36 文章编号 ：1005—9873(2OO6)01--0033--04 响应面法优化富硒金针菇菌株发酵培养基的研究 周 丹 ，刘世玲 ，边银丙 (华 中农业大学应用真菌研究所 ，武汉 430070； 。宜昌市微生物研究所，湖北宜 昌 433000) 摘 要 ：用响应面法对富硒金针菇菌株液体发酵培养基进行优化 。在供试 的碳、氮源 中，以单因子方法筛选 出玉米淀粉和豆饼粉作为最适碳源和氮源。采用全因子试验法，对 KHzPO 、MgSO ·7Hz0、玉米淀粉和豆饼 粉等 4个影响因素的效应进行评价 ，确定主要影响因子为玉米淀粉和豆饼粉。再用最陡爬坡实验逼近 以上 2 个 因素的最大响应区域 ，最后采用 中心组合设计法及响应面分析法 ，确定了主要影响因素的最佳浓度为玉米 淀粉 28．8g／L，豆饼粉 14．2g／L。 关键词 ：碳源 ；氮源 ；最陡爬坡实验 ；中心组合设计 中图分类号 ：S646．15O．4 文献标识码：A 金针菇 Flammulilnaveluptipes(Curt．：Fr．) 麸和酵母粉 。采用 可溶性 淀粉 296／，KH PO Sing]是一种高蛋 白、低热量、富含多糖的营养保健 0．1％，MgSO ·7H O0．05 的液体培养基，分 食品，有益于儿童的智力发育L】]。金针菇所含的朴 别添加浓度 196／的5种氮源L1]。每个处理设置 3 菇素具有显著的抗癌和降胆固醇的作用 ，可预防高 个重复，测定菌丝体的平均干重 。 血压和治疗消化道炎、肝炎等。通过金针菇深层液 1．4菌丝体干重测定方法 体发酵，可以开发各种保健饮料。在金针菇深层发 平板培养基配制见参考文献E2]。量取上述 酵条件研究中，通常采用正交方法优化发酵培养 液体培养基 100mL，装入 250mL摇瓶 ，八层纱 基 ，但该方法不能考察各种影响因素 的交互作用 ， 布封 口，121℃灭菌 30min，接种 6个 6mm 的菌 当因素较多时存在试验次数太多等问题。本研究 种块 ，25℃条件下 l60r／min培养 6d。培养液 采用单因素方法和响应面方法，对影响深层发酵金 通过滤网过滤，收集菌丝体，干燥箱 中6O℃干燥 针菇产量的主要因子进行筛选和优化。 至恒重，称量 。 1．5发酵培养基的优化方法 1 材料与方法 l_5．1全因子实验设计 选取 4种营养成分作 1．1供试菌株 为 4个因子 ，全因子试验设计为 4因素 2水平 的 供试菌株为富硒能力较强的突变菌株 57(华 2设计 ，共 16次试验 。估计因子的主效和交互作 中农业大学菌种实验 中心提供)，系 由栽培菌株 用 ，根据试验数据拟合二元一次方程 ，确定爬坡 F40经紫外诱变、筛选获得。 方向，由此接近最大响应区域。 1．2碳源试验 1．5．2最陡爬坡实验 响应面拟合方程只在考 供试碳源为玉米淀粉、蔗糖、可溶性淀粉、糊 察紧接邻域才充分近似真实情况，在其他区域拟合 精和米粉。采用蛋 白胨 1 ，KH PO 0．1％， 方程与被近似的函数方程毫无相似之处 ，几乎无意 MgSO ·7HO0．05 的液体培养基，分别添加浓 义。最陡爬坡实验以实验值变化的梯度方 向作为 度 2％的5种碳源[】j。每个处理设 3个重复 ，测 爬坡方向，根据各因素效应值确定变化步长，逼近 定菌丝体 的平均干重 。 最大响应区域。 1．3氮源试验