罗格列酮对ol说etf大鼠肺组织tgf.docxVIP

天津医科大学硕士学位论文中文摘要 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的：糖尿病(diabetes mellitus，DM)是多种因素引起的以慢性高血糖为特征的 全身性代谢紊乱，可导致机体多器官系统损害的一组临床综合征。随着DM并 发症研究的深入，DM肺部损害已经越来越受到关注。近年来研究证实DM肺损 害也是DM全身多系统病变的一部分，DM可显著增加肺纤维化的风险。转化生 长因子Dl(transforming growth factor bctal，TGF．B1)是促纤维化的细胞因子， 在多种器官纤维化进程中扮演重要角色。c-Jun氨基末端激酶(c．JunNH2．terminal kinases，孙Ⅸ)信号通路为TGF．B1下游的重要信号转导通路，JNK的异常表达 可影响TGF．I：11的活性，进而改变纤维化的进程。近年研究发现，JNK过度激活 与DM肝脏纤维化以及非DM肺间质纤维化密切相关，而关于TGF．BI／JNK信 号转导通路与DM肺纤维化的研究尚少。a．平滑肌肌动蛋白(a．smooth muscle actin，a-SMA)及I型胶原(collagen I，COL I)是TGF．1}1／JNK信号转导通路 下游衡量肺纤维化形成的两个重要指标。罗格列酮(rosiglitazone，RGT)是过 氧化物酶体增殖物激活受体丫Qer0)【isome prolifcrator-activatcd receptor Y，PPAR7) 的合成配体，RGT不仅具有改善胰岛素敏感性，降低血糖的作用，还具有潜在 的器官保护作用及抗纤维化的作用。本研究通过应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)观察自发性DM大鼠—oLETF大鼠肺组织 TGF．B1的表达变化，应用免疫蛋白印迹法(Western Blotting)观察磷酸化JNK (phosphorylatcd c-Jun NH2-terminal kinases，p-JNK)、a．SMA及COL I的表达 变化，探讨TGF．／31／JNK信号途径是否为DM肺纤维化的发病机制之一，并设立 RGT干预组，观察上述指标的变化以探讨RGT是否对DM肺纤维化具有保护作 用。 方法：4周龄OLETF大鼠30只和其同系非DM对照鼠LETO大鼠8只，在无 特定病原体级条件下单笼饲养，饲以标准饲料。大鼠每4周行一次口服葡萄糖 耐量试验(oral glucose tolerance test，OGTT)。至30周龄时，共有成模OLETF 大鼠16只，随机分为模型组(DM组)8只和RGT干预组8只，LETO大鼠为 正常对照组(N组)。RGT组每日以RGT3mg／kg的给药剂量灌胃，DM组与N 组以等量蒸馏水灌胃，各组均灌胃给药12周，每日1次。42周龄时处死大鼠， 留取肺组织，部分置于10％中性福尔马林中固定，部分置于液氮中固定，．80℃ 低温冰箱保存后进行如下步骤：@HE染色光镜下观察肺组织结构变化；② 天津医科大学硕士学位论文Masson染色观察肺组织胶原沉积情况；③应用ELISA法检测各组大鼠肺组织 天津医科大学硕士学位论文 Masson染色观察肺组织胶原沉积情况；③应用ELISA法检测各组大鼠肺组织 TGF．131的表达情况，并用450rim波长酶标仪测出其对应的蛋白浓度；④应用 Western Blotting半定量分析大鼠肺组织P。JNK、a．SMA、COL I蛋白的表达；用 凝胶图象处理系统，以B—aetin或GAPDH为内参照，以相应蛋白条带与B．aetin 或GAPDH的比值计算蛋白的相对表达量。 结果：@HE染色结果显示：N组大鼠肺组织结构正常；DM组大鼠肺组织结构紊 乱，支气管壁增厚，肺泡隔增宽，部分肺泡腔萎缩、塌陷，肺间质增加，并有 炎症细胞浸润；RGT组大鼠肺组织病变较DM组减轻，但肺组织结构未恢复到正 常。②Masson染色结果显示：N组大鼠肺泡隔、细支气管、小血管周围仅有少量 胶原纤维：DM组肺间质胶原纤维增多，排列紊乱；RGT组肺间质胶原沉积较DM 组减轻，但仍未恢复至正常。③三组大鼠肺组织均有TGF．B1、P—JNK、a．SMA 及COL I表达。与N组大鼠相比，DM组大鼠肺组织TGF．61、P．INK、a-SMA及COL I表达均显著增加(尸0．05)，差异有统计学意义；RGT组与DM组相比，TGF．61、 P．JNK、a．SMA及COL I表达减少(PO．05)，差异有统计学意义。 结论：@OLETF大鼠肺组织出现病理结构改变，胶原沉积增多，呈现出纤维化 趋势，提示肺脏亦是DM的靶器官。(奎)OLETF大鼠肺组织TGF—D1、P．JNK、a．SMA 及COL I表达量较LETO大鼠显著增加，提示