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* * 高中生物专题复习 生物工程 概念：也叫生物技术，是生物科学与工程技术有机结合而兴起的一门综合性科学技术。以生物科学为基础，运用先进的科学原理和工程技术手段来加工或改造生物材料，如DNA、蛋白质、染色体、细胞等，从而生产出人类所需要的生物或生物制品。 基因工程 细胞工程发酵工程 酶工程 内容： 基因操作的工具 1.基因的剪刀── 特点:一种限制内切酶只能识别 ，并在 上将DNA分子切断。 2.基因的针线── 　　作用： 限制性内切酶 一种特定的核苷酸序列 特定的切割位点 DNA连接酶 将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 DNA连接酶作用位置 3.基因的运输工具—— 　　必须同时满足三个要求： 运载体 ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； ③具有某些标记基因,便于进行筛选等. ②具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接； 第一步：获取目的基因： 基因工程基本步骤 鸟枪法 逆转录法 直接合成法 ①基因的直接分离 ②人工合成 途径 对应方法 ⑵ 人工合成基因法 以信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下将脱氧核苷酸合成DNA(基因)。 优点：专一性强 不足：信使RNA不稳定,存留时间短 ①逆转录法： 根据蛋白质的氨基 酸顺序推算出信使RNA核苷酸顺序，再据此推算出基因DNA的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。 优点：专一性强 ⑵ 人工合成基因法 不足：只适用于一些核苷 酸对较少的简单基因 ②直接合成法： 第二步：目的基因与运载体结合 第二步：目的基因与运载体结合 用与提取目的基因相同的 切割质粒使之出现一个切口，将 插入切口处，让 与切口上的黏性末端互补配对后，在 的作用下连接形成重组DNA分子。 限制酶 目的基因 目的基因的黏性末端 连接酶 第三步：目的基因的导入和表达 通过运载体把目的基因带入受体细胞内，并使目的基因在受体细胞中扩增、能准确地转录和翻译。 常用的受体细胞有 、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和 等。 大肠杆菌 动植物细胞 第四步 目的基因的检测和表达 　　大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的菌落，并进一步培养、研究。 　　 基因诊断的技术和方法 1.核酸分子杂交 是指用已知序列的DNA或RNA片段作为探针与待测样品的DNA或RNA序列进行核酸分子杂交。 2.分子探针 是指一段特定的已知核酸片段，能与互补核酸序列进行分子杂交，用于对待测核酸样品中特定基因（碱基）顺序的探测。 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 细胞工程 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 植物细胞工程 植物组织培养形成的愈伤组织进行培养， 又可以分化形成根、芽等器官，这一过程称为： A、脱分化 B、去分化 C、再分化 D、脱分化或去分化 下列不能作为植物组织培养的材料是： A、秋海棠的叶 B、马铃薯的块茎 C、成熟的花粉 D、木质部中的导管细胞 *