表达H9亚型禽流感病毒血凝素基因重组鸡痘病毒及其免疫效力.pdf

卷 期 ! ! 微 生 物 学 报 %’ (! . (! 年 月 ## $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ )*+*,- ## !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 表达 亚型禽流感病毒血凝素基因的 ! 重组鸡痘病毒及其免疫效力 程 坚 刘秀梵 彭大新 刘红旗 （扬州大学畜禽传染病学农业部重点开放实验室 扬州 6##2 ） 摘 要：以 法扩增获得 亚型禽流感病毒（ ）分离株（ ）的 7859:7 ;2 )% )= :?@ABC= :?CD= E= 122$ 血凝素（ ）基因，将其定向插入鸡痘病毒转移载体 的痘苗病毒启动子 的下游，得 ;) 1136 93 F6 到重组转移载体1136;)。以脂质体转染法将 1136;) 转染至已感染鸡痘病毒$G! 疫苗株 （ ）的鸡胚成纤维细胞（ ）中，通过在含 的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑获 H-5E9% :GE I5+D’ 得并纯化 。以间接免疫荧光法证实感染 的 表达了 。 在免 JE9%5;) JE9%5;) :GE ;) JE9%5;) 疫 日龄 鸡 天后即能诱生可检出的血凝抑制（ ）抗体， 天后诱生的 抗体到达高 3 K9E 3 ; 1! ; 峰，且诱生的 抗体保持较高水平达 天。在 日龄 鸡及含抗 母源抗体的商品鸡 ; 66 3 K9E E9% 上进行的免疫效力试验表明， 能显著抑制静脉攻毒后免疫鸡从泄殖腔的排毒，效果 JE9%5;% 与)% 全病毒灭活苗相当。 关键词： 亚型禽流感病毒，重组鸡痘病毒，血凝素 ;2 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） K$6 F/6 ) ###15/#2 ## #!5#!!5#/ 禽流感病毒（ ）属正粘病毒科、 型流感病毒属。根据 对禽类致病性的差异， )% ) )% 可将 分为高致病性 和低致病性 。高致病性 所导致的禽流感对养禽业具 )% )% )% )% 有毁灭性的打击，是国际兽疫局规定的 类疾病之一；低致病性 导致的禽流感对养 ) )% ［］ 1 禽业也有较大的危害性 。因此，综合采用各种手段，包括疫苗接种的手段来控制 亚