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33 3 Vol. 33, No. 3
2 0 0 2 5 OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA May, 2 0 0 2
X
王广策 孙海宝 曾呈奎
( 266071)
RT-PCR cDNA ,
32 32
P -ddUTP P ,
4kb DNA ; , 4kb
306bp ,
306bp DNA , , 306bp DNA
, 116bp, GGTTCAATGT ,
5cCAAT box
, , ,
Q78
( ) ( Cerff, 1 5)
, , ( cytosol) ,
; ,
ATP, ( , 2001a)
, , ,
( Liaud et al, 2000) ( phosphoglycerate
mutase) , 3- 2-
, : ( 1) 2, 3-
( cofartor) , ; ( 2) 2, 3-
, , ; ( 3) ,
; (4) 2, 3-( Fothergill-
Gilmore et al, 1 3)
,
,
, ( , 1 ) ( , 1 8, 2001b) ,
X , 301704 ; , L008 , , 1 65 12
, , , E-mail: gcwang@ ms. qdio. ac. cn
: 2001- 07- 31, :2001- 12- 20
2 60 33
) ) ) ( Phaeo-
dactylum tricornutum)
,
1
1. 1
MERK , PCR METABION
1.2
( Universitaet Braunschweig) Cerff
, Charon K, DNA Sau3AI ,
7
1. 7 @ 10 pfu
1.3
( Saccharomyces cerevisiae) cDNA
1. 3. 1 RT-PCR mRNA ( Mueller et al, 1 4) ,
( Oligo dT) , cDNA, PCR
NCBI ( http:/ / www. ncbi. nih. gov) mRNA
, X5878 mRNA PCR ,
5c-CCGAATTCGACACGGTCAATCCGAATG-3c, 5c-CCGAATTCTT ACCTTG-
EcoRI EcoRI
GTTGGC-3cPCR : 10mmol/ L Tris-HCl, pH= 8. 3, 47. 5mmol/ L
KCl, 2. 2mmol/ L MgCl , 0. 4mmol/ L dNTPcs; 4 e , 75s; 72 e , 75s; 55 e , 120s;
2
35
1. 3. 2 PCR PCR -, 2 ,
, EcoRI , DNA pBluescript Ò
SK+ EcoRI , ( CIP)
(CIP)
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