专题2微生物知的培养与应用.pptVIP

挑选产生透明圈的菌落 刚果红染色法 方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应 方法二：在倒平板时就加入刚果红 思考：这两种方法各有哪些优点与不足？导学P25 方法一：缺点是操作烦琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发 生混杂； 优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用. 方法二：优点是操作简便，不存在菌落混杂问题 缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分 无菌水 碳源 无机盐 水 高压蒸汽灭菌 恒温培养箱 氮源 多 高 盐（NaCl） 选择培养基 无氮 加青霉素 圆褐固氮菌 酵母菌 液体 选择 异养型 酵母菌或霉菌 （CH2O） 调整pH 灭菌 50℃ 酒精灯火焰 青霉素和（CH2O） 纤维素粉 刚果红 红 透明圈 * 必要条件： 1、提供合适的营养和环境条件； 2、确保无其他微生物混入。 生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶) 允许特定种类的微生 物生长，同时抑制或 阻止其他种类微生物 生长 P22 P28 刚果红培养基鉴别纤维素分解菌 含有化学成分不清楚或化学成分不恒定的天然有机物，如血清、血浆、组织提取液、麦芽汁、土豆汁等。 优点：营养成分丰富，培养效果好。 缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染; 将微生物或细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配置而成的培养基。 主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。 优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低。 缺点： 缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。 合成培养基: 天然培养基： （复合培养基） P22 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 P16 P18 P20 图片 调PH、 37℃恒温箱培养 稀释涂布平板法 平板划线法 菌落 细菌的菌落特征因种而异 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 P17 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 第一步：为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物； 每次划线前：为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落； 划线结束后：及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 P18 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 本课题知识小结: 菌种的保藏 稀释涂布平板法 稀释涂布平板法 ④注意：统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。 c.设置对照组，排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高 实验结果的可信度。 ①原理： ②操作： ④注意： ③计算公式： P26 土壤取样 选择培养 梯度稀释 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 P28 土