月季的花你药培养.pptVIP

一）被子植物的花粉发育 雄蕊： 二）产生花粉植株的两条途径 人工种子 又称人造种子、合成种子或无性种子，就是将组织培养所产生的体细胞胚、不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁殖体，包裹在能提供营养的胶囊（人造胚乳）里，再在外面包上一层具有保护功能和防止机械损伤的外膜（人造种皮），造成一种类似种子的结构，能在一定的条件下萌发生长，形成完整植株。 * * 课题2月季的花药培养 植物的花药培养在育种上有特殊的意义。育种工作者可以采用花药培养的方法，使花粉粒发育为单倍体植株，再经过人工诱导使染色体加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。这样的植株不仅能够正常生殖，而且每对染色体上成对的基因都是纯合的，自交产生的后代不会产生性状分离。 单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种的培育开辟了新途径。 基础知识： 一、被子植物的花粉发育 二、产生花粉植株的两条途径 三、影响花药培养的因素 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉粒 花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历： 四分体时期、单核期、双核期 单核居中期 单核靠边期 花粉粒 注意： ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。 ④ 4个小孢子 减数 有丝 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有丝 8个精子 小孢子母细胞 花粉 花粉 胚状体 愈伤组织 从芽 从芽 生根 移栽 脱分化 分化 再分化 诱导 这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 三）影响花药培养的因素 诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中材料的选择与培养基的组成是主要的影响因素。 1、材料的选择 1）不同植物诱导成功率不同； 2）同一植物，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响。 花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般，月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。 3）选择合适的花粉发育时期 一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期（即单核靠边期），花药培养成功率最高。 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 花瓣松动后，微生物可能侵入到花药中，给材料的消毒带来困难。 2、培养基的组成 因植物不同而有所变化，其中植物激素的水平和配比，常对诱导细胞的分裂和分化起决定作用。 如： 小麦为N6培养基，马铃薯、月季为MS培养基，油菜为B5培养基。 3、其他因素 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定的影响。 一）材料的选取 二）材料的消毒 三）接种和培养 （一）材料的选取 1、花期及状态 在月季的初花期（5月初至5月中旬），选择完全未开放的花蕾。 2、花粉发育期鉴定 选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常用的方法有醋酸洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 （二）材料的消毒 1、花蕾用70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 5、无菌水冲洗3~5次 用于培养的花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。 （三）接种和培养 灭菌后的花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。 如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株