异源植物中转座因子标签研究的进展-遗传.PDF

遗传 HEREDITAS(Beijing)19(1）：41-451997 ．jOft A ． 异源植物中转座因子标签研究的进展 瞿绍洪，］2， 景健康，’ 胡 含I) (1中国科学院遗传研究所．北京 100101;2中国科学院植物研究所 ‘北京 100093) ProgressofTransposonTagginginHeterologousPlants QuShaohong1.2)JingJiankang HuHan (1InstituteofGenetics,TheChineseAcademyofSciences,Beijing100101) (2InstituteofBotany,TheChineseAcademyofSciences,Beijing100093) 转座因子标签法分离植物玉（米和金鱼草）基因至今已10多年了W（albot,1992)。玉米和金鱼草具有内源转 座因子，如果这些因子插入性状的基因将产生表型突变，这些突变具有可以辨别的特征，即转座因子从原插人位 点转座后产生回复突变，使体细胞组织呈镶嵌v（ariegated）表型．然后可用转座因子作探针，克隆被突变的基 因 一般来说，转座因子插人特定位点的频率为10-`_10-6‘就是说，通常至少筛选1了一106个玉米种子、以便 得到转座因子插人引起的突变体。上述方法在玉米中运用很成功，所以人们想到那些目前尚未克隆出转座因子的 异源植物、把上述已知的转座因子转化，在异源植物中进行转座因子标签研究则非常诱人。 随着植物遗传转化方法日臻完善，已将玉米转座因子Ac/Ds,En/Spm，或金鱼草转座因子Tam3用于转 化烟草B（aker等，1986;Pereira等．1989;Martin等，1989)、马铃薯K（napp等，1988;Frey等，1989)、番 茄Y（oder等，1988)、拟南芥V（anSluys等，1987).，胡萝 卜V（anSluys等，1987)}矮牵牛H（aring等，1989), 水稻(Murai等，1991),葛芭(Yang等，1993)、亚麻F（innegan等，1993)、毛叶曼陀萝的单倍体T（hilo等、 1994)和百脉根(T（hykjaer等，1995）等异源植物，转座因子都表现转座活性。最近3年里，通过Ac/Ds和 Spin/dSprn插人产生表型突变，已先后分离出拟南芥。矮牵牛、烟草和番茄的有关基因。这些研究成果，为异 源植物的转座因子标签研究展示出广阔的前景。 目前有两类玉米转座因子用在异源植物的转座因子标签研究中，即Ac/Ds系统和Spin/dSpm或（En/1) 系统。每一系统可以只用自主转座因子如（A。或Spm)，也可以把非自主转座因子如（Ds或dSpm）和从自主因子 改造而来的转座酶基因一起使用 ‘这样便有自主转座因子标签法和双因子标签法(tw（o-elementtransposontag户“ 9）两种形式 ‘ 根据转座因子随机插人异源植物的基因还是定向插人特定的基因位点，又有靶位点标签法t（argeted transposontagging）和非靶位点的随机标签法r（andomtransposontagging）两种策略。 近年来，有人提出在细胞和组织水平上筛选转座因子的插人突变。该方法称为体细胞转座因子标签法 (somatictransposontagging)(Hehl,1994),1986年Baker等用Ac因子转化烟草并检测到Ac转座是异源植物中 转座因子标签研究的开始。直到 1993年的7年间，虽然对转座因子在异源植物中的行为和转座机理进行了系统 研究，并不断改进转座因子解离和转座的检测方法，但一直未能找到转座因子插人的表型突变体和相应的基因。 曾经有人怀疑能否用转座因子分离到异源植物的基因W（albot,1992)‘令人鼓舞的是，在 1993年该领域出现全 面突破，先后从拟南芥A（arts等，1993;Bancroft等，1993;Long等，1993;James等，1995),矮牵牛C（huck 42 遗 传 HEREDITAS(Beijing)1997 19卷 等．993),烟草(Whithatn等，1994)和番茄 J（ones