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第3章 细 胞 工 程第3章 细 胞 工 程1概述2动物细胞培养3植物细胞大规模培养4转基因动植物5干细胞技术6干细胞技术3.1、概述最初利用哺乳动物细胞培养生产疫苗大都采用原代哺乳动物细胞在血清培养基中进行培养,易受污染、效率低、生产成本高,随后出现的动物细胞株重组化、培养基无血清化以及新型培养工艺的出现,极大地促进了动物细胞培养的工业应用,使哺乳动物细胞培养已经成为新型的生物工程产业。3.2 动物细胞培养哺乳动物细胞种类及其性能1动物细胞培养的环境特性2动物细胞大规模培养3昆虫细胞培养43.2.1、哺乳动物细胞种类及其性能3.2.1.1 原代细胞3.2.1、哺乳动物细胞种类及其性能3.2.1.2 连续化细胞3.2.1、哺乳动物细胞种类及其性能3.2.1、哺乳动物细胞种类及其性能3.2.2、动物细胞培养的环境特性3.2.2.1 动物细胞培养的生物特性3.2.2、动物细胞培养的环境特性3.2.2.2 哺乳动物细胞培养的营养要求3.2.2.3 哺乳动物细胞培养方法3.2.3、动物细胞大规模培养3.2.3.1 动物细胞的贴壁培养3.2.3、动物细胞大规模培养3.2.3、动物细胞大规模培养3.2.3、动物细胞大规模培养3.2.3.2 动物细胞的悬浮培养(1)间歇培养(2)补料-分批培养(3)灌流培养3.2.3、动物细胞大规模培养3.2.3、动物细胞大规模培养3.2.3.3 动物细胞培养的应用3.2.4、昆虫细胞培养将目的蛋白基因插入到杆状病毒的基因组中,该病毒能非常高效地感染昆虫,从而形成一个表达重组蛋白的天然工厂。目前,大规模昆虫细胞培养主要用于生物杀虫剂、昆虫病毒、生产。3.3 植物细胞大规模培养植物细胞株的建立与培养1植物细胞培养的细胞生理特性2植物细胞培养生物反应器的研究3植物细胞培养的应用4植物细胞培养的发展趋势53.3.1、植物细胞株的建立与培养3.3.1.1 愈伤组织的诱导与培养3.3.1、植物细胞株的建立与培养3.3.1、植物细胞株的建立与培养3.3.1.2 培养条件的优化(1)物理因素(2)化学因素① 溶氧② 植物细胞悬浮培养的培养基3.3.1、植物细胞株的建立与培养3.3.1、植物细胞株的建立与培养接上图3.3.2、植物细胞培养的细胞生理特性3.3.2、植物细胞培养的细胞生理特性3.3.3、植物细胞培养生物反应器的研究3.3.3、植物细胞培养生物反应器的研究3.3.3、植物细胞培养生物反应器的研究3.3.4、植物细胞培养的应用3.3.4.1 利用植物细胞培养进行药物生产(1)太平洋紫杉细胞培养生产抗癌药物-紫杉醇(2)人参细胞培养生产人参皂苷和人参多糖(3)毛地黄细胞培养转化毛地黄毒苷3.3.4.2 利用植物细胞培养生产天然色素3.3.5、植物细胞培养的发展趋势3.3.5.1 建立和选择高产植物细胞系3.3.5.2 植物组织化培养3.3.5.3 固定化细胞技术3.3.5.4 产物促进释放技术3.3.5.5 产物合成与分离耦合过程3.4 转基因动植物转基因动物1转基因植物23.4.1、转基因动物3.4.1.1 常用的建立转基因动物方法①显微注射法②逆转录病毒感染法③胚胎干细胞④精子载体法⑤体细胞核移植法3.4.1.2 转基因动物的应用3.4.1、转基因动物3.4.2、转基因植物3.4.2.1 转基因植物的构建①农杆菌导入法②基因枪法③花粉管通道法④原生质体融合法3.4.2.2 转基因植物在农业上的应用3.4.2.3 转基因植物用于生产药用蛋白质3.4.2.4 转基因植物的安全性2.4.3、用于真核生物宿主的载体2.4.3.1 YIP载体2.4.3.2 YRP载体2.4.3.3 YAC载体2.4.3.4 其他质粒3.5 干细胞技术干细胞分类1干细胞的分离与培养2干细胞的研究进展3干细胞的应用前景和障碍43.5.1、干细胞分类干细胞即未分化的细胞,是一类具有自我更新和分化发育潜能的原始细胞,机体的各种细胞、组织和器官、甚至完整的生物都是通过干细胞分化发育而成的。3.5.1、干细胞分类3.5.2、干细胞的分离与培养由于干细胞的数目很少,因此需要在体外对干细胞进行非分化性增殖。可以通过加入适当的生长因子对干细胞的增殖和分化进行调控,使之向指定的方向发展,调控方法主要有内源性调控、细胞内蛋白和转录因子三种。3.5.3、干细胞的研究进展3.5.3.1 胚胎干细胞人体发育起始于卵子的受精,产生一个能发育为完整有机体潜能的单细胞,即全能性的受精卵。3.5.3.2 造血干细胞造血干细胞是造血细胞的种子。3.5.3.3 间充质干细胞3.5.3.4 神经及其他干细胞3.5.4、干细胞的应用前景和障碍研究干细胞的最初目的是揭示从单一的受精卵细胞到完整生命的发展过程以及成体中健康细胞替代受损细胞的机理。①健康心肌细胞的移植可为慢性心脏病病人
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