生长因子pgrn及其衍生工程蛋白atsttrin在钛离子诱导的骨溶解及骨关节炎中的作用临床医学外科学专业论文.docxVIP

山东大学博士学位论文CATAI。OGUE 山东大学博士学位论文 CATAI。OGUE Part I Atsttrin，an engineered protein deriVed f．rom progranulin gro、机h f．actor，is therapeutic in osteoarthritis throu曲TNFR sigIlaling Chinese abstract ．．1 English abstract ．．5 Introduction ．11 Material and methods ．．14 Results 22 Discussion 31 Figures 35 Ref-erences 44 Parrt II Pro伊anulin suppresses titanium particle induced inflammatoDr osteolysis through 1NFcc signaling Chinese abstract 47 English abstract ．50 Introduction ．54 Material and methods ．56 Results ． 。61 Discussion 65 Figures 67 Ref色rences 74 Publication ．76 English Paper l ．78 English Paper 2 119 English Paper 3 ．155 Acknowledgement ．172 万方数据 山东大学博士学位论文第一部分PrOgranuIin衍生工程蛋白Atsttr 山东大学博士学位论文 第一部分PrOgranuIin衍生工程蛋白Atsttr in通过TNFR信号 通路对骨关节炎发挥保护作用 中文摘要 骨关节炎是关节炎中的一种，是一种常见的慢性退化性疾病，以关节软骨破 坏，关节软骨基质丢失，关节滑膜炎症产生，关节软骨下骨硬化以及骨赘形成为 主要特点。骨关节炎影响了世界15％的人口，然而却没有一种方法能有效的预防 或治疗骨关节炎。现在市场上销售的药物多以缓解关节炎症，降低疼痛为主要治 疗目的，却没有能从根本上改善或者治疗骨关节炎。在本研究中，我们探索了生 长因子progranulin的衍生的工程蛋白Atsttrin在骨关节炎动物模型中的作用。 首先，我们发现作为progranulin的衍生工程蛋白，Atsttrin能够缓解由于 progranuIin确失而引起的加重的骨关节炎。 其次，在手术诱导的骨关节炎小鼠模型中，我们发现Atstcrin能有效预防关 节软骨的丢失破坏。并且，Atsttrin能显著降低在骨关节炎发展过程中发生的滑 膜炎。而且，Atsttrin能显著减少软骨下骨破骨细胞的生成，有效抑制软骨下骨 的骨丢失，以维持软骨下骨的厚度。更重要的是，行为学检查发现局部注射 Atsttrin能明显降低骨关节炎相关疼痛。更进一步，我们分离出背根神经节进行 基因检测分析，发现Atsttrin在神经节中能显著降低炎症相关性的疼痛因子的基 因表达。 除了预防作用之外，我们发现Atsttrin在非侵入性骨关节炎大鼠模型中， Atsttrin能有效治理骨关节炎。因为Atsttrin能够和肿瘤坏死因子受体(Tumor Necrosis Factor Receptors，TNFRs)特异性结合，为进一步明确Atsnrin发挥作用 的机制，我们在野生型小鼠，肿瘤坏死因子受体1基因敲除(nlmor Necrosis Factor Receptorsl l(nockout，TNFRl．／．)鼠和肿瘤坏死因子受体2基因敲除(T啪or Necrosis Factor Receptors2 lmockout，TNFR2．／-)鼠中建立了手术诱导的前交叉 万方数据 山东大学博士学位论文韧带离断性骨关节炎模型，待骨关节炎成功诱导之后，我们局部注射Atsttrin。 山东大学博士学位论文 韧带离断性骨关节炎模型，待骨关节炎成功诱导之后，我们局部注射Atsttrin。 研究发现，在野生型小鼠中，Atsttrin能有效保护关节软骨，在n师Rl基因敲除 鼠中，Atsttrin仍有一部分保护作用，然而同野生型小鼠比较，保护作用相对减 弱。相反的，在n吓l也基因敲出鼠中，Atsttrin介导的关节保护作用完全丧失了。 因此，Atsttrin介导的保护作用依赖于TNFRl和n吓I也两条信号通路。 为进一步明确在此过程中的分子机制，我们发现Atsttrin通过调节软骨代谢 来发挥其作用。首先，我们发现Atsttrin具有促进合成代谢的作用。具体的说， Atsttrin能够促进软骨合成代谢的基因标志物，如二型胶原，蛋白聚糖的表达。 为探索Atsttrin激活的信号通路，我