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高密度脂蛋白SOPAHDL临床意义.doc
1检测原理
此方法的原理催化胆固醇氧化酶(CO)与高密度脂蛋白以外的未酯化胆固醇之间的反应,并用某种 特定的清洗剂选择性地溶解高密度脂蛋白。在试剂1川,高密度脂蛋白以外的未酯化胆固醇要进行一 种酶反应,由此生成的过氧化物在与DSBmT之间进行的一种过氧化物酶反应中消耗掉,生成一种无色 产物。试剂2由专门能够增强高密度脂蛋白的对溶性清洗剂、胆固醇酯酶和染色联结剂构成,用于在 高密度脂蛋白胆固醇定量测定中进行显色。这种方法也可称为“催化剂选择性清洗剂”方法学。
HDL、LDI八VLDL、乳糜微粒 催化剂+C0 无反应的LDL、VLDL、乳糜微粒
?
DSBmT +过氧化物酶
HDL HDL特异性清洗剂 -HDL溶解
?
IIDL胆固醇 胆固醇酯酶 X 胆綃烯酮+ 1LO2
~胆固醇氧化酶°
2H2O2 + DSBmT + 4-氨基安替比林 —过氧化物酶_>显色
2标本采集与处理
1采血方法
空腹不抗凝静脉采血2?3ml。
2.2标本保存
血清保存于4°C冰箱中3d内稳定。一20°C冰箱保存可稳定数周。长期储存则应在一70°C以下, 血清不可反复冻融,否则LDL-C值不稳定。
3注意事项
除卧床患者外,一律坐位休息5min后取血。止血带使用不超过lmin,静脉穿刺成功后松开止血带, 让血液缓缓流入针管。血标本应尽快送实验室,室温下静置30?45min后离心(最多不超过3h);即时 吸出血清,在密闭的小试管中保存。操作时避免阳光直照。溶血标本干扰检测。
3试剂和设备
1试剂
采用西门子医学诊断产品(上海)有限公司提供的试剂盒。
1. 1试剂组成
试剂船1?2孔为MES缓冲液,胆固醇氧化酶<1000 U/L,过氧化物酶<1300 ppg U/L, N, N-双(4- 硫丁基)-甲基-甲苯胺-磷酸氢二钠,(DSBmT) <1 mM,催化剂〈1 mM,防腐剂<0.06%,液体;4孔为 MES缓冲液,胆固醇酯酶<1500 U/L, 4 -氨基安替比林CmM,清洗剂<2%,抑制剂〈0. 15%,防腐剂<0. 06%
,维生素C氧化酶3000 U/L,液体;5~6孔为氢氧化钾1.00 M,液体。
1.2试剂准备
直接使用。
1.3试剂保存
试剂2?8°C保存,有效期内稳定。
3.2质控品
美国BIORAD液体多项质控殆。
3.3校准品
西门子校准品。
4仪器
SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。
4操作程序
1检测过程流程
签收样品?离心- 上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。
2样品签收
严格按照标本接收程序签收标本。
3标本处理
以2500?3000「/min,离心6?lOmin,分离血清上机测定。如不能及时检测,分离血清于2-8°C保存。
4.4标本检测
4. 1手工编排测试项目:样品按编号装入样品架,主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号,按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字,按enter,在Sample No处输入样品号,按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目,根据需要选择相应的 按键改变Mode (按F7:MEXT MODE选择样品管类型)、Priority (按F4:NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式)、Fluid (按F8:NEXT FLUID选择标本类型)。
4.4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。
4.4.3运行:输入完毕后按F3:LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上,按Run键,仪器开始进行 样品检测。
4.4.4检验后标本保存
标本检验完成后用采血管原盖盖紧,保存于标本冷藏库内,按日期放好,保存期为7天。
5校准程序
I校准品准备和储存
直接使用,2?8°C保存。
2校准条件
在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。
3校准程序
主屏幕按 F5: PROCESS CTRL-F1: CALIBRATION,按 enter-F2: SET-UP RUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称METHOD,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名0perator校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置,按F4: ASSIGN CUPS指定样品杯,校准液按顺序排列在样 品架上,按F7: LOAD/RUN-F4: RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
1质控品准备和储存
质控品为液体,可以直接使用。原包装质控品-1
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