多基因遗传修饰猪体外抑制猪流感病毒增殖的初步分析兽医专业论文.docxVIP

密级： 密级： 论文编号： 中国农业科学院 学位论文 多基因遗传修饰猪体外抑制猪流感病毒增殖的 初步分析 Supression of Swine Influenza Virus Proliferation in vitro of Polygene Genetically Modified Porcine 硕士研究生；臧凤霞 指 导 教 师：孟庆文副研究员 申请学位类别：兽医硕士 专业领域名称：兽医 培 养 单 位：哈尔滨兽医研究所 中国农业科学院研究生院 201 5 年5 月 万方数据 Secrecy． Secrecy． No． Chinese Academy ofAgricultural Sciences Dissertation Supression of Swine Influenza Virus Proliferation in vitro of Polygene Genetically Modified Porcine M．S．Candidate：Zang Fengxia Supervisor：Associate Prof．Meng Qingwen Degree：Master ofAgricultural Extension Specialty：Veterinary microbiology and molecular biology April 2015 万方数据 独创性声明 独创性声明 鋈 本人声明所星交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得雕 究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含舅 人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教篇 构的学位或证书而使用过的材料．与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡 均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 研究生签名臧1虱鼻乏 时间：20眵譬s月砑日 关于论文使用授 日 日九 潺 万方数据 中国农业科学院 中国农业科学院 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 论文题目 多基因遗传修饰猪体外抑制猪流感病毒增殖的初步分析 论文作者 臧风霞 专业 兽医专业 研究方向 兽医微生物及其 分子生物物学 中图农业科学院哈尔滨兽医 指导教师 孟庆文 培养单位(研究所) 研究所 姓名 职称 硕 单 位 专业 銎名 评 刘云 教授 颔导口 东北农业大学 兽医 ＼ ≮ 博导囱 阅 硕导口 人 黄显会 教授 博导团 华南农业大学 兽医药理 答 爱 鞠嘲模式慧。≮双疾病鲞。 凇}j：■岛i》。、％+．’ 辩 硕导口 吴英杰 教授 大连医科大喾 教授 博导团 大连医科大学‘二 实验动物学i? 鬻}|‘ 主 甏■誓隧麟黪除陵隧黛蘼鬣牒縻一～．1 席 博导团 器 臻孽 *8拳藓动物t0’ 预导口 ；“露!r I^’j．·o—j萋 研究员” 硕导口 哈尔滨兽医研究所 预防兽医学 麒。 王靖宇 仇华吉 博导囝 答 硕导团 瑶黛蘸i? 贾洪林 副研究员 哈尔滨兽医研究所 预防兽医学 博导口 副研究员 博导口 哈尔滨兽医研究所 预防兽医学 讳攀攀 辩 硕导团 韩凌霞 委 硕导口 员 博导口 硕导口 博导口 硕导口 博导口 会议记录(秘书) 赵丽丽 论文答辩时间地点 2015年5月26日哈尔滨兽医研究所学术报告厅 万方数据 摘要猪流感(Swine 摘要 猪流感(Swine influenza，SI)是由猪流感病毒(Swine influenza virus，SIV)引起的一种急 性、高度接触性的群发性呼吸道传染病，能够造成猪群免疫抑制，给养猪业带来重大危害，同时 会给人类健康构成威胁，具有重要的公共卫生意义。RNA干扰(RNA inierference，RNAi)是在进 化过程中高度保守、由双链RNA(double．stranded RNA，dsRNA)诱发的高效特异性地降解同源 mRNA的现象，能特异抑制病毒基因的表达；Mx蛋白是I型(o．／13)和l儿型(U干扰素(IFN)诱导产 生的细胞自身天然抗病毒活性的关键效应分子，是一种广谱的抗病毒蛋白。现代养猪生产，生产 性状与抗性性状之间存在一定程度的遗传拮抗，单纯追求高产目标通常导致猪抵抗力降低：通过 转基因技术改造猪的遗传性状，提高机体免疫力，可能是控制传染性疾病的有效手段。 本实验室前期筛选出RNAi、Mx和4shRNA三个基因，并在细胞水平或小鼠体内或者静脉猪 体内证实证明三个基因具有抗病价值。在此基础上本研究探索将这三个基因联合构建到慢病毒载 体中，包装慢病毒后感染猪胎儿成纤维细胞制各核供体细胞，通过体细胞核移植技术成功获得FO 代克隆猪。运用分子生物学方法PCR、Southern blot、RT-PCR、Western blot分别在DNA、R