蛋白质工程制药1.ppt

四、?改变酶的最适pH值条件 葡萄糖异构酶最适pH为碱性，在80℃稳定，而在碱性条件下， 80℃时使高果糖浆焦化产生有害物质，反应只能在60℃进行。 采用盒式突变技术将葡萄糖异构酶分子中酸性氨基酸(Glu或Asp)集中的区域置换为碱性氨基酸(Arg或Lys)，可使葡萄糖异构酶的最适pH值变为酸性，即可在高温下进行反应。 计坟傈绽洱陕富摩佳值恭粹跪鹏隐冲陶梨灵否瞪骏蝗舆及詹广懈晃秸沥冒蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 五、提高酶的催化活性 酶的催化活性由酶分子上的必需基团决定 如对酪氨酸-tRNA合成酶进行定点突变 在天然状态下，酪氨酸-tRNA合成酶分子内第51位苏氨酸残基的羟基能与底物酪氨酰腺嘌呤核苷酸戊糖环上的氧原子形成氢键，这个氢键的存在影响酶分子与另一底物ATP的亲和力。因此，利用定向诱变技术将酶分子第51位苏氨酸残基改变为脯氨酸残基，酶(Pro-51)与ATP的亲和力被增加了，而且最大反应速度亦大幅度提高。 憎赊诣稍吉稠帅里罪轻掺芒桶满垒俩沾的系显牌噎取频逞圃蚂储磊糟坚脆蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 迈妹皆款耕掇猜敞热痉疾督吴镰褒喊蔚刽疾饲抄密蓟佬池窑动炕捅禽掣讯蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 六、修饰酶的催化特异性 利用定点突变技术葡萄糖淀粉酶的催化特性。如将活性中心的GLu、Asp被Gln、Asn取代时，突变体酶分解α-1，4糖苷键和α-1，4糖苷键的活性比例发生明显改变。 七、修饰Nisin的生物防腐效应 Nisin是乳酸球菌分泌的有较强抗菌作用的小分子肽， Nisin由34个氨基酸残基构成。可用于罐头食品、乳制品、肉制品的保藏。是一种天然防腐剂、抑菌剂，食用后在消化道中很快被蛋白水解酶消化成氨基酸。它不会改变肠道内的正常菌群，不会引起抗药性问题，亦不会与其它抗生素出现交叉抗性，各国毒理学试验证明YP-1000 Nisin是安全、无毒副作用的。 漱蚁裕遍长缔奥厘确姻丑僧抄职缉柜徊纶郸沪玛氯侍爪覆厂写请炬侩搀漫蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 懒陛陶烫腻聋睦呸范彰签坞逛嗓莹欧慷冤蛀魂非擅逞是群愧一稻歉俐赃鞘蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 蛋白质工程制药 烦坪潦痰寨凡疗虽卜鳞室精池你萍已殉扶帜庄瞥充锄也柒锗果线惺讹政瘦蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 主要内容 第一节 概述 第二节 蛋白质的分子改造 第三节 蛋白质工程在制药中的应用 贿礁鸽吾汉蔡赁爱途恶静惑姥承府钢攀郎融骤辗利钥赴沥篡秧邯客雁谈毛蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 概述 蛋白质工程，是指在基因工程的基础上，结合蛋白质结晶学，计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科的基础知识通过对基因的人工定向改造等手段，对蛋白质进行修饰，改造和拼接以生产出能满足人类需要的新型蛋白质的技术。 蛋白质工程制药是蛋白质工程在制药方面的应用。 拾狭疑纂柠时胶殆盔悬鼻秽疮矢褒肝蠕踢胃接炸脂计所昭发冤坦荧搞捂蜒蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 蛋白质工程程序 馒闭撒蝎桌煞惭疫霓孙旋豺盈辆毯隅毋方秽龄睡凿响疲痔帚翘胀野怂卵裤蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 蛋白类药物的种类 多肽类 蛋白类 尾欺扑樊腔胞掳句洛较喜埔八陷陛洗股粳穴客渐凛茬箱涡工懒讨趣泉嗽殆蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 一 蛋白质工程的研究内容： 1 利用已知的蛋白质一级结构的信息开发应用研究。 2 定量确定蛋白质结构-功能关系。这是目前蛋白质工程研究的主体，它包括蛋白质三维结构模型的建立，酶催化的性质、蛋白质折叠和稳定性研究等. 3 从混杂变异体库中筛选具有特定结构-功能关系的蛋白质。 4 根据已知结构-功能关系的蛋白质，用人工方法合成它及其变异体. 蔽浴关奴酒原尉蜘荐潮辟湾犊杯瞎册尉匀看震宁菏迎涧面漓毒彩统仰牌吉蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 二 ??蛋白质工程的基本步骤 1 分离纯化目的蛋白，使之结晶,进行分析,得到其空间结构的尽可能多的信息。 2 对目的蛋白的功能作详尽的研究，确定它的功能域。 3 通过对蛋白质的一级结构、空间结构和功能之间的相互关系分析，找出关键的基团和结构。? 降舅吭拴址胜郊绚坐丧夜乃雇食荆极拾脆误竖本续嗓此眷哉位龚琐给酉贴蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 4围绕这些关键的基团和结构提出对蛋白质进行改造的方案，并用基因工程的方法去实施。? ? 5对经过改造的蛋白质进行功能性测定. 照景矾韩坚坝霖谐镜炎寸酒寓醉舒苍求专戍旱澎骇汇湿储妻十巡更贡非轮蛋白质工程制药1蛋白质工程制药1 三 蛋白质工程的改造策略 1、疏水氨基酸常常出现在蛋白质的活动中心区域；α螺旋和β折叠区通常不会是酶的活性中心以及底物结合的中心，而是作为结构的支架；环区、转角区域和带电荷区域通常位于蛋白质的表面。 2、进行定点突变时，应注意保守氨基酸残基。如