2017-18学年高中生物第一章第二节植物组织培养技术第2课时分离特定的微生物并测定其数量教案.docxVIP

第二节　分离特定的微生物并测定其数量 1．认识各种微生物形成的菌落特征。 2．学会利用涂布平板法分离、培养微生物，并测定其数量。(重难点) 3．掌握利用选择培养基分离特定微生物的方法。(重点) 微 生 物 的 分 离 1．分离原理 在实验室中利用选择培养基可以筛选和分离出某种微生物，然后在高度稀释的条件下，在固体培养基上培养该微生物形成的单个菌落，即为纯培养物。 2．分离方法 (1)平板分离法：包括涂布平板法和混合平板法。能将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面，每个孤立的活微生物体经过生长、繁殖均可形成单个菌落。 (2)选择培养分离：科学家针对某种微生物的特性，设计一个特定的环境，使之特别适合这种微生物的生长，而抑制其他微生物的生长。这种通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术，称为选择培养分离。 (3)根据菌落特征初步分离： ①菌落的含义：是指单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度，形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。 ②菌落特征：不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落一般都具有稳定的特征，如菌落的大小、形状、边缘特征、隆起程度、颜色等，这些可以成为对微生物进行分类、鉴定的重要依据。 [合作探讨] 探讨1：在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌吗？ 提示：标准的单个菌落中只含有一种细菌。 探讨2：如果要分离厌氧菌，应在什么条件下培养？ 提示：在无氧条件下培养。 探讨3：在选择培养分离微生物的过程中，“选择培养”的培养基按物理性质划分属于什么培养基？为什么？ 提示：固体培养基。便于选择、分离所需要的微生物。 [思维升华] 1．涂布平板法与混合平板法的比较 比较 操作 特点 结果 涂布 平板法 取一定稀释度的样品涂布平板 ↓ 用无菌玻璃刮铲将样品涂布均匀 先制作琼脂平板后加入菌液 细菌菌落通常仅在平板表面生长 混合 平板法 取一定稀释度的样品与熔化的琼脂混合 ↓ 将与样品混合后的琼脂倒入无菌培养皿 菌液与琼脂混合，共同倒平板 细菌菌落出现在平板表面及内部 2.选择培养基的选择作用 (1)原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。 (2)方法： ①在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。 ②改变培养基中的营养成分。例如，缺乏氮源时可以分离固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出能消除石油污染的微生物；用含无机碳源的培养基分离自养型微生物。 ③改变微生物的培养条件。例如，将培养基放在高温环境中培养可以得到耐高温的微生物；用普通培养基在无氧条件下分离厌氧型和兼性厌氧型微生物。 1．微生物的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，关于两者的区别下列说法正确的是(　　) 比较方面 平板划线法 稀释涂布平板法 ① 需在无菌条 件下操作 不需无菌操作 ② 培养基中 不加琼脂 培养基中加有琼脂 ③ 不可计算菌液 中的活菌数 可计算菌液中的活菌数 ④ 需要接种环 需要玻璃刮铲 A.②、④　　　　　　 B．③、④ C．①、④ D．②、③ 【解析】　平板划线法和稀释涂布平板法都需要进行无菌操作，避免杂菌污染；平板划线法和稀释涂布平板法都使用固体培养基，培养基中都加有琼脂；平板划线法采用接种环或接种针进行接种，而稀释涂布平板法采用玻璃刮铲进行接种；稀释涂布平板法可计算菌液中的活菌数，平板划线法不能计算出菌液中的活菌数。 【答案】　B 2．下面是本课题将用到的培养基配方，请根据下表回答下面的问题： 【导学号 编号 成分 含量 ① KH2PO4 1.4 g ② Na2HPO4 2.1 g ③ MgSO4·7H2O 0.2 g ④ 葡萄糖 10.0 g ⑤ 尿素 1.0 g ⑥ 琼脂 15.0 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (1)在该培养基的配方中，为微生物提供碳源的是________，提供氮源的是________。 (2)绝大多数微生物都能利用________，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解________。 (3)分析该培养基的配方，该培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，又是如何进行选择的？ 【解析】　碳源是提供碳元素的物质，氮源是提供氮元素的物质。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以这种培养基对微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 【答案】　(1)葡萄糖　尿素 (2)葡萄糖　尿素 (3)具有。以尿素为唯一氮源的培养基可以分离到产生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。 土 壤 微 生 物 的 分 离 、 培 养 与 数 量 测 定 1．涂布