2017-18学年高中生物课时跟踪检测十三多聚酶链式反应扩增DNA片段.docxVIP

课时跟踪检测十三 多聚酶链式反应扩增DNA片段 (满分50分　时间25分钟) 一、选择题(每小题3分，共24分) 1．下列有关PCR技术的叙述，错误的是(　　) A．PCR技术利用的是碱基互补配对原则 B．PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等 C．PCR技术需在体内进行 D．PCR技术可分为变性、复性、延伸三个阶段 解析：选C　PCR技术是聚合酶链式反应的简称，是在体外快速大量复制DNA片段的一种新技术。 2．PCR一般要经过三十多次循环，从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时将(　　) A．仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸 B．与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸 C．同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链延伸 D．无需与引物结合，在酶的作用下从头合成子链 解析：选B　当由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链作模板时，此单链引物端为5′端，因此与它互补的子链应从另一端开始合成，即与引物Ⅱ结合延伸DNA的子链。 3．在PCR扩增实验中，引物是很重要的。下列属于引物特点的是(　　) ①引物长度一般是80～100个碱基对(bp)为宜 ②DNA聚合酶能从引物的5′端开始延伸DNA链 ③引物是一小段DNA或RNA ④引物能与DNA母链的一段碱基序列互补配对 A．①②　　　　　　　 B．③④ C．①③ D．②④ 解析：选B　引物长度一般以20～30个碱基对(bp)为宜，包括引物Ⅰ和引物Ⅱ两种。引物太短或太长，都可能降低产物的特异性。引物是一小段DNA或RNA，它能与DNA母链的一段碱基序列互补配对；DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链，当引物与DNA母链结合后，DNA聚合酶就能从引物的3′端开始延伸DNA链。 4．在PCR扩增DNA的实验中，根据设计，一分子DNA经30次循环后，应得到约230个DNA分子，但结果只有约210个DNA分子。出现该现象的原因可能是(　　) ①循环次数不够 ②Taq DNA 聚合酶活力不够或其活性受到抑制 ③引物不能与母链结合 ④系统设计欠妥 A．①②③ B．①②④ C．①③④ D．②③④ 解析：选B　解答本题应从PCR扩增过程的条件进行分析： ①循环次数过少，产物的量比预期的少； ②Taq DNA聚合酶活力不够或其活性受到抑制，导致催化效率降低，得到的产物比预期的少； ③如果引物设计不合理，则无法进行扩增； ④PCR系统设置不妥，达不到预期的效果。 5．下列有关PCR技术的叙述，错误的是(　　) A．聚合酶链式反应，是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术 B．在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似 C．PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，只需提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸即可 D．PCR一般经历三十多次循环，每次循环均分为变性、复性和延伸三个阶段 解析：选C　PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行，需提供DNA模板、分别与两条模板链相结合的两种引物、四种脱氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。 6．右面为DNA变性和复性示意图，下列相关说法错误的是(　　) A．向右的过程为加热(80～100 ℃ B．向左的过程是DNA双链缓慢降温复性 C．变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同 D．图中DNA片段共有2个游离的磷酸基、2个3′端 解析：选C　DNA体外的变性同体内的解旋实质是相同的，都是使氢键断裂，DNA双螺旋打开，只是体内需解旋酶，体外是高温条件。 7．复性温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度冷却至40～60 ℃ A．由于模板DNA比引物复杂得多 B．引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞 C．加入引物的量足够多而模板链数量少 D．模板链加热解旋已经变性不可能再次结合 解析：选D　复性的原理是碱基互补配对，解旋后DNA分子变成单链，碱基序列未发生改变，冷却后仍可以进行复性。 8.“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，如图2所示，其中第⑤种DNA分子有几个(　　) 图1 图2 A．2 B．4 C．6 D．8 解析：选D　PCR技术扩增时，由两种引物决定所扩增的片段的特定序列，上一次循环的产物为下一次循环的模板。第一次循环形成①和②，第二次循环形成①②③④四个DNA，以此类推4次循环后共形成16个DNA，其中①②各一个，③④各三个，⑤共8个。 二、非选择题(共26分) 9．(13分)资料显示，近十年来，PCR(聚合酶链式反应)技术成为分子生物