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浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 A54多肽修饰氧化还原响应型糖脂纳米载体的构建与评价 浙江大学药学院 药学(专业学位) 2013级硕士研究生 刘娜 导师 胡富强教授 中文摘要 功能性纳米给药系统的设计与评价，旨在克服现有纳米给药系统稳定性差、 靶向性不足、不能有效释放药物等缺陷，近年来已成为药剂学领域研究的热点之 一。本研究利用肿瘤细胞内外还原型谷胱甘肽(GSH)的浓度差异(100～1000倍)， 以及肿瘤细胞与正常细胞之间的浓度差异(7～10倍)，设计得到还原敏感型的糖脂 纳米载体(CSO．SS．SA)，并进一步构建A54多肽修饰聚乙二醇(PEG)化的还原 敏感型糖脂纳米载体(A54．PEG．CSO。SS．SA)。A54多肽经PEG链接修饰的嫁接物 胶束，可延长体内循环时间，提高嫁接物胶束的肿瘤组织靶向分布。二硫键作为 糖脂间的桥链，特异性响应肿瘤组织内环境较高的GSH浓度，发生二硫键断裂， 迅速释放药物，正常组织内无GSH浓度的响应性，释放药物少，可实现纳米给药 系统的高效安全治疗。 本研究以3，3．二硫代二丙酸作为交联剂，合成二硫键糖脂嫁接物(CSO．SS—SA)， 采用碳二亚胺(EDC)偶联法、N，N’．二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)为链桥，合 成A54．PEG．CSO．ss-SA。A54一PEG．CSO．SS．SA嫁接物可在水性介质中自聚集形成 胶束，其数均粒径为50．83±10．4 nlTl，分布均匀，临界胶束浓度为54．9 lag／mL。以 阿霉素(DOX)为模型药物，经透析法制备嫁接物载药纳米粒 (A54．PEG．CSO．SS．S～DOX)，其数均粒径为48．36-1-4．3 nm，包封率为77．92％， 在10 mM GSH浓度条件下，快速释放包封药物DOX。体外细胞摄取实验结果表 明，A54多肽修饰的纳米载体，可加快BEL．7402细胞摄取，增加细胞内的药物浓 度。以尼罗红(NR)为模型药物，二硫键链接的糖脂纳米载体(A54一PEG—CSO．SS．SA) 细胞内释放速率明显大于非二硫键链接的糖脂纳米载体(A54-PEG-CSO．SA)。 A54．PEG—CSO．SS．SA／DOX的ICso值为1．344-0．58 gg／mL，明显低于CSO-SS-SA／ III 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 DOX及非敏感对照A54-PEG．CSO．SA／DOX给药系统的IC50值，药物细胞毒性提 高了0．6～1．0倍。 以荷BEL．7402瘤裸鼠为模型动物，A54．PEG．CSO—ss．SA／DiR体内分布结果表 明，A54多肽的修饰能够显著增加嫁接物胶束在肿瘤部位的分布，且能够维持较 长时间。FITC标记纳米载体，以NR为模型药物，体内药物释放结果表明， A54一PEG．CSO—SS．SA嫁接物胶束能够特异性响应肿瘤组织内较高GSH浓度，快速 释放药物，而肝脏组织内基本无药物释放；心脏组织切片的荧光照片显示， A54．PEG．CSO．SS．SA嫁接物胶束在心脏组织内未见有明显分布。模型动物药效学 研究结果显示，等剂量的A54一PEG．CSO．SS．SA／DOX嫁接物载药纳米粒，其疗效与 市售阿霉素制剂相当，其正常组织内游离药物浓度，以及心脏组织内药物分布， 均明显低于市售制剂，具有较高的安全性。 本研究结果表明，A54．PEG．CSO．SS．SA嫁接物胶束具有较好的BEL．7402肝癌 组织靶向性，在靶细胞内快速释放药物，提高药物疗效。同时，可减少正常组织 及心脏的化疗药物毒性，提高用药安全性，是一种具有潜在发展优势的主动靶向 纳米给药系统。 关键词：糖脂纳米胶束；主动靶向；氧化还原响应；肿瘤细胞内环境释放；减少 化疗药物毒性 1V 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 英文摘要 Studies on construction and evaluation of A54 peptide modi- fled redox--responsive glycolipid--like drug delivery syst