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Biophoton 生物体的超弱发光有哪些基本特性？它与哪些生命活动相关？为什么利用生物体的超弱发光能够用于疾病的诊断？ 为何生物的超弱发光? 它与哪些生命活动相关？ 为何“代谢发光”或者“相干机制” 针对超微弱发光的检测，有哪些测量技术，分别说明其测量原理。 超弱发光有哪些应用？ Fluorescence 利用分子能级图解释分子光谱涉及的各种能量跃迁过程。 荧光是如何产生的？有什么特点？ 分子结构与荧光的关系。 理解与掌握荧光光谱中的一些重要概念（包括：Beer-Lambert定律、被测组分对紫外光或可见光具有吸收，且吸收强度与组分浓度成正比。吸光度与透过率的换算、摩尔吸收系数与浓度之间的关系、斯托克斯位移、荧光量子产率的定义、荧光亮度、光稳定性、荧光寿命） 荧光检测包括哪些参数？（发射谱、激发谱、stokes 位移、量子产率、荧光寿命） 生物体中主要的内源荧光色团有哪些？通过对它们的监测可获得哪些生物学信息组织的结构基质：胶原蛋白和弹性蛋白；细胞内代谢路径：NAD 、 NADH。组织结构信息和代谢活性 向生物体内引入外源荧光可发挥什么作用？监测细胞功能与化学分布，RNA or DNA序列，以及肿瘤标记 选择荧光探针的依据是什么？（激发波长、发射波长、光稳定性、漂白性、荧光的定性或定量、荧光探针的特异性和毒性、pH适宜值） 荧光探针导入：（酯化法；形成乙酰羟甲基酯（AM）；细胞膜通透性增强法；使用透膜剂使膜通透性增强；微注射法； 将染料通过显微注射法直接注入细胞内） 按照制备方法分，荧光探针有哪些种类？ ? 化学荧光探针:化学方法合成的 ? 基因荧光探针:可遗传、由DNA编码、蛋白质组成的 选择探针时需要主要考虑哪些因素？激发波长 ，发射波长，光稳定性、漂白性，荧光的定性或定量?， 荧光探针的特异性和毒性， pH适宜值 在蛋白质分子中，能发射荧光的氨基酸有哪些？它们的吸收和发射波长在哪里？ 绿色荧光蛋白有哪些生物化学特征和光谱特征？野生型和增强型的绿色荧光蛋白有什么异同？ 荧光强度大大提升，吸收峰转移到488nm，与实验室经常用到的FITC滤光片一样。 绿色荧光蛋白突变体有哪些性能特点？ 突变提高了GFP的光谱性质，荧光强度和和光稳定性也大大增强，突变后的激发峰488nm，发射峰是509nm，这与FITC滤光片一致，提高了其潜在的使用价值。 荧光蛋白作为标记物或指示剂的优势有哪些？ 低浓度对样品干扰小 3D测量 非常适合溶液和细胞 非常灵敏，实现单分子检测 产生FRET的条件有哪些？ FRET是指能量给体（Donor）与受体（Acceptor）间通过偶极-偶极耦合作用以非辐射方式传递能量的过程 即能量给体被激发后，从基态跃迁到激发态，由于偶极-偶极相互作用，供体分子激发态能量hν以非辐射方式传至受体分子，而后受体分子通过发射光子弛豫，释放能量。 条件是： 1.一种荧光蛋白的发射光的波长与另一种荧光蛋白的吸收光的相同。 2.工体和受体之间产生耦合。 什么是Forster距离？常用FRET对的Forster距离大概在什么范围？ Forster能量转移：一对合适的荧光物质可以构成一个能量供体 (donor) 和能量受体 (acceptor) 对 , 它们之间由于偶极的相互作用 , 激发供体分子的光子能量 h ν可能被传递至受体分子 , 而后受体分子通过发射出光子 h ν′ (h ν h ν′ ) 而松弛 , 这就是 1948 年由 Forster 首先提出的荧光共振能量转移理论（ 1） 。其直观的表现就是供体和受体之间达到合适的距离内 (1 ～ 10 nm), 以供体的激发光激发 , 供体产生的荧光强度比它单独存在时要低得多 , 而受体发射的荧光却大大增强 , 同时伴随它们的荧光寿命的相应缩短和拉长。 应该是1--10nm，（注：这个概念课件上没有，是网上找到的结果。） Optical properties 常用的组织光学特性参数有哪些？如何描述其基本概念 （吸收、反射、散射、散射的各向异性因子、约化散射系数） ?? 吸收系数μa (mm-1)光子在无限小距离ds 运动时被吸收的几率，其倒数表示光子在介质中被吸收前所走过的平均距离 ?? 散射系数μs (mm-1)光子在无限小距离ds 运动时，被散射的几率，其倒数表示光子在介质中被散射前所走过的平均距离 ?? 各向异性因子g单次散射模式非对称性的量度，反映的是散射光在不同方向的分配情况 g??(-1~1) g=0 各向同性散射 g=1 高度的前向散射 g=-1 高度的后向散射 掌握几个派生的组织光学特性参数及表达式：约化散射系数、总的衰减系数、有效衰减系数、扩散射系数、穿透深度、有效穿透深度 约化散射系数μ′s (mm-1)在远离边界与光源的表况下常用一个参数来描述光子的散射特