高中生物必修一实验知识点总结.pptVIP

* * 实验课题：观察DNA和RNA在细胞中的分布 一、实验原理 1.碱性染料能使核酸着色，甲基绿和吡罗红均为碱性染料； DNA﹢甲基绿→绿色，RNA ﹢吡罗红→红色。 甲基绿与吡罗红作为混合染料使用可显示细胞中DNA和RNA在细胞中的分布。 2.盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 补：高温﹑酸﹑碱等条件能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞。 我们观察到细胞核中的DNA被染成绿色 而细胞质中的RNA被染成红色。 操作步骤 注意问题 解释 取口腔上皮细胞制片 载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞 将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效果 保持细胞原有形态 消毒为防止感染，漱口避免取材失败 固定装片 水解 将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸溶液中，用300C水浴保温5min 改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色 冲冼涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片 洗去残留在外的盐酸 染色 滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min 观察 先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察 使观察效果最佳 步骤总结 斐林试剂 苏丹Ⅲ 橘黄色 红色 砖红色沉淀 紫色 苏丹Ⅳ 双缩脲试剂 鉴定物质 试剂 实验现象 还原性糖 脂肪 蛋白质 淀粉 碘 蓝色 生物组织中还原性糖、脂肪、蛋白质和DNA的鉴定 还原性糖+斐林试剂→砖红色沉淀 还原性糖：葡萄糖、麦芽糖、果糖 非还原性糖：蔗糖、淀粉等 + → 水浴加热 脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色 脂肪+苏丹Ⅳ→红色 取少量脂肪样液，加入苏丹Ⅲ，震荡，可看到溶液呈了橘黄色，本实验我们用苏丹Ⅲ做染液。 蛋白质+双缩脲试剂→紫色络合物 豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。 本实验我们用蛋清做实验材料，在用蛋清做实验材料时，要注意将蛋清稀释，如果稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底。 问题探讨: 1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？ 作对照 2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能 过量？ 过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。 深化 比较项目 斐林试剂 双缩脲试剂 不 同 点 使用方法 甲液和乙液混合均匀后方可使用，且现配现用 使用时先加A液再加B液 呈色反 应条件 需水浴加热 不需加热即可反应 反应原理 还原糖中的醛基被Cu(OH)2氧化，Cu(OH)2被还原为Cu2O 具有两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2＋反应生成络合物 颜色 砖红色 紫色 浓度 乙液CuSO4溶液浓度为0.05 g/mL B液CuSO4溶液浓度为0.01 g/mL 相同点 都含有NaOH溶液、CuSO4溶液两种成分，且所用NaOH溶液浓度都是0.1 g/mL * *