实验性自身免疫性重症肌无力的体液免疫调节神经病学专业论文.docxVIP

CATALoGUEPart CATALoGUE Part I Abstract in Chinese I ．1 Abstract in English I 5 Abbreviations I ．．10 Research p印er I 12 Introduction ．．12 】Ⅵaterials and methods ．．1 5 Results ．25 Discussion 30 Ref．erences 34 Part II Abstract in Chinese II 40 Abstract in En91ish II 44 Abbreviations II 48 Research paper II ．50 Introduction ．50 Materials and methods ．．53 Results ． ．． 59 Discussion 64 Ref．erences 66 Acknowledgements ．70 Publications ．71 Comments and Defense Report on DisseIrtation ．．74 English paper 1 ．．75 English p印erII ．84 万方数据 山东大学博士学位论文论文I 山东大学博士学位论文 论文I 他汀修饰的树突状细胞对实验性自身免疫性重症肌无力的 体液免疫调节 专 业：神经病学 博士生：李亨 导 师：段瑞生教授 中文摘要 研究背景：重症肌无力(Myasthenia gravis，MG)是一种由抗体介导、T细胞依赖、 补体参与的经典的器官特异性自身免疫性疾病，由于神经肌肉接头突触后膜上的 乙酰胆碱受体损伤而导致神经肌肉接头处传递功能障碍。目前临床上针对重症肌 无力的免疫治疗主要包括糖皮质激素和免疫抑制剂，因其缺乏特异性，且需要长 期应用，副作用较大，因此促使我们探索新的治疗策略和方法。 树突状细胞(dendritic cells，DC)是体内最重要的专职抗原提呈细胞，根据 其成熟状态的不同，既可以诱导免疫反应，也可诱导免疫耐受。他汀类药物是临 床常用的抗动脉粥样硬化药物，近来研究发现其作用机制除降低血脂外，更重要 的是其抗炎及免疫调节作用。我们的前期研究发现，应用阿托伐他汀在体外修饰 脾脏来源的树突状细胞，可诱导树突状细胞呈不成熟状态。给实验性自身免疫性 重症肌无力(experimental autoimmune myasthenia gravis，EAMG)大鼠腹腔注射 这些不成熟DC，可缓解EAMG的发展，减少抗体的产生。其机制主要是抑制了 EAMG的细胞免疫反应，表现为抑制淋巴细胞增殖，上调调节性T细胞，使 Thl／Thl7细胞反应转化为Th2细胞反应。然而，他汀修饰的DC减少抗体产生 万方数据 山东大学博士学位论文的具体机制仍不明确，尤其是对体液免疫反应的影响及作用机制仍有待进一步研 山东大学博士学位论文 的具体机制仍不明确，尤其是对体液免疫反应的影响及作用机制仍有待进一步研 究。 近来研究发现一群以CXCR5(CXC chemokine receptor 5，CXC趋化因子受 体5)、ICOS(inducible T_cell costimulator，诱导性协同刺激分子)、PD．1 (programmed deam protein一1，程序性死亡受体1)、Bcl6 (B-ceU lymphoma 6，B 细胞淋巴瘤因子6)及lL．21为特征的新的细胞亚群，即滤泡辅助性T细胞 (follicular helper T cells，Tfll)。Tfll直接辅助B细胞产生抗体，在体液免疫反 应过程中发挥重要作用，因此在很多自身免疫性疾病的研究中备受关注。另外， 调节性B细胞(regulatory B cells，Breg)作为一群发挥负性调节作用的B细胞， 其发现挑战了B细胞提呈抗原和分泌抗体的传统观点。因此，耐受性DC对 EAMG大鼠的Tfh和Breg的影响也是本研究关注的重点。 研究目的：探讨阿托伐他汀修饰的骨髓源性DC对EAMG体液免疫的调节及机 制。 研究方法： 1．EAMG模型的建立及临床评分 用大鼠来源的AChR仪亚基97．116肽段(R97．116)免疫Lewis大鼠，第11 天加强免疫一次，建立EAMG模型。采用双盲法隔天进行观察并评分，评分标 准参考Le珊on评分方法，结果以每个时间点的平均数表示。 2．骨髓源性DC的诱导、培养与表型检测 无菌条件下取免疫后20天的EAMG大鼠的胫骨和股骨，冲洗骨髓腔得到骨 髓细胞悬液，去除红细胞后接种于培养瓶中。贴壁3天，去除悬浮细胞后继续培 养。第8天加入药物处理，他汀组(AT．BMDC)加入阿托伐他汀(10¨M)， 对照组(0-BMDC)加入等体积的DMS