葛根黄酮体内药物代谢动力学与神经活性及其增强桑白皮降糖活性机制的研究生药学专业论文.docxVIP

中国医学科学院北京协和医学院学校代码：10023 中国医学科学院北京协和医学院 学校代码：10023 学 号：B2012009002 博士学位论文 葛根黄酮体内药物代谢动力学与神经活性及 其增强桑白皮降糖活性机制的研究 所院： 药用植物研究所 姓名： 肖冰心 指导教师： 常琪研究员 导师小组： 廖永红潘瑞乐刘新民研究员 学科专业： 生药学 研究方向： 药代动力学 完成日期： 2015．04 万方数据 中国医学科学院北京协和医学院lIIIIII 中国医学科学院北京协和医学院 lIIIIII II IIIII II I IIIIIIIIIl 目 录 Y281 81 01 摘要 。 ．．． ．。 ABSTRACT ． 第—部分葛根黄酮体内药代动力学与神经活性研究 前言 ． 10 1葛根黄酮的生物活性研究进展 10 1．1抗氧化和提高学习记忆能力作用 10 1．2降血糖作用 10 1．3降血压作用 11 1．4抗血栓作用 11 1．5改善心血管功能作用 11 1．6抗脑缺血损伤作用 12 2葛根黄酮的药物代谢动力学研究进展 一13 2．1葛根黄酮的体内吸收与分布 13 3本部分研究的主要内容与意义 14 参考文献 一15 第一章大鼠血浆及微透析液中葛根黄酮的uFl,c-璐／as测定方法的建立 。18 1．1刺‘料 ．20 1．1．1药品与试剂 ．．20 1．1．2仪器 ．21 1．1．3动物 ．．21 1．2方法 ．21 1．2．1葛根总黄南提取物制备 21 1．2．2葛根总黄酮提取物中主要成分的含量测定 ．21 1．2．3色谱条件 22 1．2．4质谱条件 ．22 1．2．5标准溶液的配制 ．．23 1．2．6人工脑脊液的配制 ．23 1．2．7标准样品和质控样品的配制 23 1．2．8生物样品处理 ．24 1．2．9方法学考察 24 1．3结果与讨论 25 1．3．1 LC．MS／MS检测条件的选择 ．25 1．3．2血浆样品处理方法的选择 26 1．3．3方法学考察 27 1．3．3．1方法的特异性 27 1．3．3．2基质效应 ．．27 1．3．3．3线性范围、最低检测限和最低定量限 ．．29 1．3．3A精密度、准确度和回收率 30 1．4本章小结 ．33 第-ill葛根黄酮在大鼠血浆及脑脊液内的药代动力学研究 ．34 万方数据 中国医学科学院北京协和医学院2．1材料 中国医学科学院北京协和医学院 2．1材料 35 2．1．1药品与试剂 ．35 2．1．2仪器 ．35 2．13动物 ．36 2．2方法 ．．36 2．2．1大鼠脑微透析探针导管植入手术 ．．36 2．2．2颈静脉插管手术 38 2．223人工脑脊液的配制 ． 38 2．2．4探针的使用 38 2．2．5给药 39 2．2．6侧脑室局部微透析样品的采集 ．39 2．2．7血浆样品采集 40 2．2．8样品处理和分析 40 2．2．9数据处理 ．40 2．3结果与讨论 40 2．3．1探针回收率 40 2．3．2给药后生物样品中的5个黄酮化合物的UFLC．MS／MS分析 ．41 2．323大鼠静脉给药后葛根黄酮在血浆中的药代动力学特性 ．43 2．3．4大鼠静脉给药后葛根黄酮在脑脊液内的药代动力学特性 ．43 2．3．5葛根黄酮的血脑脊液屏障透过特性 ．47 2-3．6大鼠口服给药后葛根黄酮在血浆中的药代动力学特性 ．47 2．4本章小结 ．50 第三章葛根黄酮在大鼠脑纹状体内的药物代谢动力学与神经活性研宄 51 3．1材料 51 3．1．1药品与试剂 52 3．1．2仪器 ．．52 3．13动物 。52 3．2方法 ．．52 3．2．1大鼠脑微透析探针导管植入手术 一52 3．2．2颈静脉插管手术 53 3．2．3人工脑脊液的配制 53 3．2．4探针体外回收率测定 53 3．2．5给药 53 3．2．6微透析样品的采集 53 3．2．7样品处理和分析 ．54 3．2．8数据处理 56 3-3结果与讨论 56 3．3．1 UFLC．MS／MS检测神经递质方法的建立 56 3．3．2纹状体透析样品的UFLC．MS／MS分析 ．58 3．3．3缺血性脑损伤进程中的神经递质水平变化 。 ．．59 3．3．4葛根黄酮对大鼠纹状体细胞外液神经递质水平的影响 ．60 3．3．5葛根黄酮在大鼠纹状体中的药代动力学特性 ．63 Ⅱ 万方数据 中国医学科学院北京协和医学院3．4本章小结 中国医学科学院北京协和医学院 3．4本章小结 67 参考文献 。．67 第二部分葛根黄酮增强桑白皮降糖活性的机制研究 70 ’lf扩言 ． 。 70 1桑白皮的药理活性研究进展 一70 1．1降血糖作用 70 1．2降血压、利屎作用 71 1．3镇咳平喘作用 71 1．4抗炎、抗病毒、