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and NbTOM3一silencedⅣbenthamiana plants.The above results suggest that
NbTOM3 may have similar function as NbTOMI in inhibition of TMV replication
AtTOMl一like genes were also amplified in Lycopersicon esculentum by RT-PCR using specific primers designed based on reposed AtTOMl一like sequences(GenBank accession numbers AB 1 9304 1,AB 1 93042,AB 1 93043).The three fragments
(LeTHl,LeTH2 and LeTH3)were then introduced into the same TbCSV DNA 1.based silencing vector to obtain recombinant vector DNA 1:LeTH 1.LeTH2.LeTH3.The recombinant vector was introduced into Agrobacterium tumefaciens strain EHA 1 05 by triparental mating,then CO—inoculated with TYLCCNV into tomato.20 days after
inoculation,semi-quantitative RT-PCR assay demonstrated that all of the Le THl, LeTH2 and LeTH3 mRNA accumulation was inhibited.GFP visualization and
Northern blot analysis of the silenced tomato plants challenge.inoculated with TMV:GFP indicated that TMV multiplication was inhibited.The function of Le THl, LeTH2 or LeTH3 and their redundancy need be further investigated.
The TbCSV DNAl一based silencing system is an effective and symptomless silencing system.It can be used for rapid identification of gene function.Inhibition of AtTOMl-like genes via RNA silencing is a potentially useful method for generating
TMV-resistant plants
Key words:Nicotiana benthamiana,tomato,tobacco mosaic virus,replication, virus induced gene silencing
浙江火学硕十学位论文致谢
浙江火学硕十学位论文
致谢
本文是在导师周雪平教授的悉心指导和启发下完成的。周老师严谨的治学态 度、敏锐的学术眼光、不懈的工作热情、豁达的处事态度,高瞻远瞩的实验设计 思路和执着的敬业精神令学生受益匪浅。对导师在学业上的悉心指导、生活上的 无私关怀和个人发展上的积极鼓励,学生致以衷心的感谢!
本文的顺利完成与实验室诸位老师和同学的帮助和无私关怀是分不丌的。 感谢李桂新老师在实验室管理方面所做的工作及为我们在学习和生活上提供的 关心和照顾。特别感谢钱亚娟师姐在实验方案上的指导和论文修改上无私的帮 助;感谢吴剑丙师姐教我实验技术:感谢黄昌军师兄在我实验上给予的帮助;感 谢我的女友给我的支持。还要感谢病毒室其他兄弟姐妹给我的关怀。在此仅给所 有给予我帮助的老师和前来后往的兄弟姐妹们表示衷心的感谢和良好的祝愿。
最后,还要特别感谢我的父母和家人给予我无私的支持和帮助,是他们的 理解和支持使我顺利的完成了学业!
两年研究生生活匆匆而过,美丽的华家池,熟悉的实验室,慈爱的导师,可 爱的同学和朋友都将永远留在我的记忆旱!
谭钟
2007。9.】
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