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实验性妇科实寒证与乏氧的关系及加减温经汤对乏氧调节作用的研究中西医结合临床专业论文

河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 否则,承担相应法律责任。 研一魂翮签哨冶吻二毫 矽夕多年乡 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名:/乏夕既 万方数据 目 目 录 中文摘要 ..1 英文摘要 ..4 英文缩写 ..8 研究论文实验性妇科实寒证与乏氧的关系及加减温经汤对乏氧调节 作用的研究 前言日U吾 ..1。0一.. 材料与方法 ..1l 结果 ..18 附图 ..21 附表 ..29 讨论 ..31 结论“ .. .43 参考文献 ..43 综述乏氧诱导因子一1的研究进展 ..: 49 致谢 ..56 个人简历 ..58 万方数据 中文摘要实验性妇科实寒证与乏氧的关系及加减温经汤对乏氧调节作用 中文摘要 实验性妇科实寒证与乏氧的关系及加减温经汤对乏氧调节作用 的研究 摘 要 目的:观察妇科实寒证模型大鼠血清、子宫组织、卵巢组织乏氧诱 导因子一l(HIF.1a)、内皮素一1(ET.1)、血管内皮生长因子(VEGF) 水平的变化特征及其与生殖内分泌激素的关系,探讨妇科实寒证的发生 与乏氧的关系;采用加减温经汤进行干预,探讨加减温经汤对乏氧的干 预效果。 方法:清洁级健康雌性SD大鼠60只,2月龄,体重为200+209, 适应性喂养1周,采用随机数字表法将其随机分为3组:正常组、模型 组、治疗组,每组20只。选用冰水冷冻法制备妇科实寒证动物模型。造 模第1天开始,治疗组大鼠按3.5lg/2009/天的给药标准给予加减温经汤 灌胃,1次/日,连续2周。其它两组大鼠均给予同体积蒸馏水灌胃。2周 后于动情间期断头处死大鼠。断头取血,离心,分离血清,选用放射免 疫分析法测定血清E2、P、T、FSH、LH的含量;采用双抗体夹心的 ABC—ELISA法检测血清HIF.1 0【、ET、VEGF的水平。迅速剖取子宫组织 及卵巢组织,剔除周围组织。右侧子宫组织、卵巢组织分置于浓度为4% 的多聚甲醛溶液中,固定,梯度酒精脱水,二甲苯透明,包埋,HE染色 后观察组织学形态及选用免疫组织化学法观察子宫组织、卵巢组织 HIF.1a、ET一1、VEGF的蛋白表达;左侧子宫组织及卵巢组织置于标记的 塑料冷冻管内,采用RT—PCR技术检测HIF.1 0【mRNA、ⅦGF mRNA。 幺七甲 拿日7尺: 1一般情况 模型组大鼠受冻后出现寒战、被毛无光、竖毛、喜扎堆、蜷缩少动、 反应迟钝、爪尾及耳缘皮肤颜色紫暗以及大便稀烂等症状。治疗组上述 症状均有明显改善。 2子宫组织及卵巢组织形态学改变 子宫组织:正常组大鼠子宫的组织形态正常,内膜较厚,固有层腺 体数量较多,血管丰富,管径较粗。模型组大鼠子宫内膜显著变薄,腺 万方数据 中文摘要体数量减少,血管腔腔隙狭窄占治疗组较模型组相比,大鼠子宫组织形 中文摘要 体数量减少,血管腔腔隙狭窄占治疗组较模型组相比,大鼠子宫组织形 态学异常有明显改善。 卵巢组织:正常组大鼠卵巢组织皮质、髓质界限分明,皮之内可见 各级卵泡,优势卵泡易见,髓质内卵巢血管丰富,形态规则。模型组大 鼠卵巢皮质内各级卵泡数目均有减少,尤以优势卵泡数量减少最明显, 髓质内血管管腔较细,腔内可见红细胞聚集,偶见红细胞边流。治疗组 较模型组相比,大鼠卵巢组织在优势卵泡数量及血管形态上均有显著改 盖 口o 3血清生殖激素含量变化 与正常组相比,模型组大鼠血清E2、P、FSH、LH、T水平下降,差 异有统计学意义(PO.01);与模型组相比,治疗组大鼠血清E2、P、 FSH、LH、T水平上升,差异有统计学意义(尸O.05);与正常组相比, 治疗组大鼠E2、P、FSH、LH、T稍有降低,差异无统计学意义(PO.05)。 4血清瑚F一1a、ET、VEGF水平的变化 与正常组相比,模型组大鼠血清HIF.1 0【含量升高,差异有统计学意 义(尸0.01);与模型组相比,治疗组大鼠血清HIF。l(x含量下降,差异 有统计学意义(尸O.01);与正常组相比,治疗组大鼠血清HIF.1 0【含量 上升,差异有统计学意义(尸O.05)。 与正常组相比,模型组大鼠血清ET含量升高,差异有统计学意义(尸 O.01);与模型组相比,治疗组大鼠血清ET含

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