肠胃返流和蛋白酶激活受体2在残胃癌发生过程中的作用腹部外科学专业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文 北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文 目录 1．4器械与材料 34 1．5主要仪器设备 34 2方法 ．．34 2．1小鼠分组及肠胃返流模型建立 34 2．2胃肠吻合术组和假手术组手术方式 34 2．3动物标本采集 35 2．4胃组织总RNA提取 ．35 2．5 RNA浓度测定和质量检测 36 2．6除去RNA中可能掺杂的基因组DNA 36 2．7 mRNA的逆转录 36 2．8 PCR扩增 ．．37 2．9琼脂糖凝胶电泳 37 2．10实时荧光定量PCR ．37 2．1l引物的设计与合成 ．38 2．12小鼠胃组织总蛋白的提取 ．38 2．13 BCA法测定蛋白浓度 ．39 2．14 Western Blot ．39 2．15免疫组化 ．40 2．16病理诊断 ．41 2．17统计学方法 ．41 结果 一42 l建立小鼠肠胃返流模型并证实肠胃返流存在 ．．42 1．1建立小鼠肠胃返流模型 42 1．2小鼠解剖证实肠胃返流存在 43 1．3测小鼠胃液胆汁酸浓度 44 2肠胃返流导致小鼠胃粘膜组织病理学改变 一44 2．1胃肠吻合术后1个月小鼠胃粘膜病理分析 45 2．2胃肠吻合术后3个月小鼠胃粘膜病理分析 46 2．3胃肠吻合术后6个月小鼠胃粘膜病理分析 47 2．4胃肠吻合术组与假手术组小鼠胃粘膜慢性炎症比较 48 3肠胃返流导致小鼠胃组织多种炎症介质表达水平升高 ．．48 3．1肠胃返流小鼠胃组织IL一6表达水平升高 ．．48 3．2肠胃返流小鼠胃组织几一8表达水平升高 一49 3．3肠胃返流小鼠胃组织TNF一仪表达水平升高 ．．50 2 万方数据 北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文 北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文 目录 3．4肠胃返流小鼠胃组织COX．2表达水平升高 ．5l 3．5肠胃返流小鼠胃组织iNOS表达水平升高 52 4肠胃返流导致小鼠胃组织PAR一2表达水平升高 ．53 4．1胃肠吻合术后小鼠胃组织PAR．2 mRNA表达水平升高 一53 4．2胃肠吻合术后小鼠胃组织PAR．2蛋白水平升高 ．．54 4．3小鼠胃组织PAR．2免疫组织化学染色 ．．55 5人残胃癌组织PAR．2免疫组织化学染色 ．55 讨论 ．．58 l建立小鼠肠胃返流模型的注意事项 ．．58 2检验小鼠模型存在肠胃返流 一59 3肠胃返流引起小鼠胃粘膜组织学病理改变 一59 4肠胃返流影响下小鼠胃组织多种炎症介质表达水平升高 ．．6l 4．1 IL．6、TNF．a高表达与小鼠胃粘膜慢性炎症有关 ．． 4．2 COX．2、iNOS高表达与小鼠胃粘膜发生癌前病变有关 5肠胃返流与小鼠胃组织PAR．2表达 ．． 5．1胃肠吻合术后小鼠胃组织PAR．2 mRNA表达增强 5．2小鼠胃组织PAR一2表达与炎症细胞因子表达有关 5．3小鼠胃组织PAR．2表达与COX．2、iNOS表达有关 ． 6 PAR．2与小鼠胃癌粘膜癌前病变有关 ． 7人残胃癌组织PAR．2免疫组化染色 ．． 8本课题的不足和展望 小结 参考文献 文献综述 基金资助 致谢 个人简历 独创性声明 矾酡酡酡∞∞甜甜甜∞酌加％刀弛为 万方数据 北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文 北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文 图表索弓 图表索引 表1．1初次胃切除术时疾病与重建方式 ．．12 表1．2初次手术良、恶组残胃癌临床病理特征比较 ．．14 表1．3 Billroth I组与Billroth II组残胃癌临床病理特征比较 ．15 表l一4近端胃切除组与远端胃切除组残胃癌临床病理特征比较 ．．18 表2．1小鼠不同时间胃组织病变例数汇总 一45 表2．2人残胃癌组织PAR．2染色阳性比例(按初次手术方式分组) ．57 图1．1初次手术良性组与初次手术恶性组患者生存率比较 ．．16 图1．2 TNM I．II期与III期患者生存率比较 ．17 图1．3 Billroth I组与BillrothII组患者生存率比较 ．17 图2．1小鼠胃及肠胃返流模型示意图 一 4 2 图2．2小鼠解剖见胃肠吻合口扩张、肠胃返流存在 一 4 3 图2．3小鼠胃液测总胆汁酸浓度 ．． 4 4 图2—4术后1个月小鼠胃粘膜HE染色切片 ．． 4 5 图2．5术后3个月小鼠胃粘膜HE染色切片 ．． 4 6 图2—6术后6个月小鼠胃粘膜HE染色切片 一 4 7 图2—7小鼠胃粘膜慢性炎症比较 一 4 8 图2—8小鼠胃组织IL．6表达 ． 4 9 图2—9小鼠胃组织几．8表达 ． 5 0 图2．10小鼠后胃组织TNF．a表达 5 1 图2．1l小鼠胃组织COX．2表达 ．． 5